番茄青枯病拮抗菌抗菌物质的研究

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1、Y9376舛单位代码!逝箜学号2四垒签Q西弗矢学硕士学位论文番茄青枯病拮抗菌抗菌物质的研究论文作者：赵凯指导教师：肖崇刚教授学科专业：植物病理学研究方向：植物病害与有益微生物提交论文日期：2006年5月10日论文答辩日期：2006年6月日学位授予单位：西南大学中国·重庆2006年5月西南大学硕士学位论文摘要摘要番茄青枯病是由茄青枯拉尔氏菌[Ralatoniasolanacearum(Smith)YabuuchieLaL]}l起的世界范围内的毁灭性病害，其防治十分困难。植物内生细菌作为病害的生防菌有～定的优势。芽孢杆菌能够产生多种拮抗物质抑制或杀死病原菌，是植物病害生防微生物的重要组

2、成部分。本试验以番茄青枯病的内生拮抗细菌为研究对象．筛选出来了对番茄青枯病具有较好的控病效果且能高产抗菌物质的菌株TR03．081，并对拮抗菌TR03．081抗菌物质的产生与积累的条件、抗菌物质的稳定性以及类别、抗菌谱进行了研究，并对拮抗菌TR03-081进行了菌株鉴定。试验研究结果如下：1、经平板抑菌试验，从供试的10个拮抗菌株中筛选出了5株抑菌带宽在5ram以上的菌株01．144、叭．189、TR03—108、TR03-081和TR03．124；温室控病试验表明．筛选出的5个菌株的去苗发酵液的控病效果总体好于其菌悬液的控病效果，其中01—189、TR03-108、TR03．08

3、1去菌发酵液的防效分别达到了53．85％、65．38％}lJ50％。通过拮抗菌去菌滤液的平板抑菌试验得到了其无菌发酵液能够在NA平板上对番茄青枯病菌产生明显抑制作用的菌株TR03-081。2、通过对TR03-081产生抗菌物质的稳定性的研究发现。该抗菌物质对热不够稳定，在1006C的水浴条件下30min即可失去抑菌活性；对光强为800Lx的光具有一定的稳定性，光照处理3611后，其抑茵活性仍保持在88．62％；对酸碱具有部分稳定性，在较强的碱性条件下不够稳定，在弱酸条件下能够部分影响抗菌物质的抑菌活性；TR03-081的无菌发酵液对蛋白酶K有一定的稳定性。3、通过对抗茵物质的产生过

4、程以及培养条件对抗菌物质产生和积累的影响的研究发现，TR03-081产生的抗菌物质是在细菌生长后期生成的次生代谢产物，发酵过程中发酵液的pH值先降后升，最后稳定在7．5左右。TR03-081产生抗菌物质的最佳发酵条件为：培养基的初始pH为7．0，培养温度为30"C，培养时间为48h，培养液体积与发酵容器之比为2：10，最适合抗菌物质产生的培养基是枯草芽孢杆菌专用培养基。4、通过对抗菌物质类别的初步鉴别得出，TR03-081产生的抗菌物质为水溶性的抗菌蛋白，溶液中硫酸铵饱和度为60％时最利于该抗菌蛋白的析出。两南人学㈣l，一他址殳摘要5、通过对TR03-081f“生抗苗物质的抗菌谱的

5、测定发现，该抗菌物质不f￡对衙茄青枯病菌具有较女r的抑悄作川．而且还对玉米小斑病菌、烟草赤星病菌、茄子褐纹{丙卤等多种病原真菌具韵较立J的抑制敛求，嗣此，该抗菌物质具有较广的抗菌谱。6、通过培养特征以及生理生化的测定，内生拮抗细菌TR03-081均为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。关键词：器茄青枯病：抗菌物质；抗菌谱；发酵条件StudyonAntibacterialSubstancesfromAntagonisticStrainsagainstTomatoBacterialWiltCandidate：ZhaoKaiAdvisor：Prof．XiaoChonggan

6、g(CollegeofPlantProtection，SouthwestUniversity,Chongqing400715，China)AbstractBacterialwiltoftomatocausedbyRalatoniasolanacearumisallimportantdiseasewhichdistributeswidelyintheworldanditisverydifficulttocontr01．Plantendophyticbacteriahavesomesuperiorityasbiocontrolagentstocontrolplantdisease．Bu

7、cillusspp．canproducemanykindsofantibacterialsubstanceswhichcanrestrainorkillthepathogens．Itisallimportantpartofplantbio-controlmicrobial．ThetomatoendophytiebacteriasagainstRalatoniasoIanacearumwasusedinthestudytoscreenthestrainswithbett