小鼠InsulinELISA试剂盒

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1、1CatNo.EM017小鼠InsulinELISA试剂盒尊敬的客户，感谢你选用本公司的产品。本产品适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织或细胞培养上清液中天然和重组的Insulin浓度。检测其他特殊样本请咨询本公司技术支持。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分。仅供科研使用，不适用于临床诊断。如有疑问，请联系依科赛生物制品有限公司。简介：胰岛素是由胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。由A、B链组成，共含51个氨基酸残基。能增强细胞对葡萄糖的摄取利用，对蛋白质及脂质代谢有促进合成的作用。胰岛素是机体内唯一降

2、低血糖的激素，也是唯一同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成的激素。检测原理:本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗小鼠Insulin单抗包被于酶标板上，同时加入标本、标准品和生物素化的抗小鼠Insulin抗体，标本、标准品中的Insulin会与加入于孔中的生物素化的抗小鼠Insulin抗体及包被于酶标板上的单抗结合，形成免疫复合物，游离的成分被洗去；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，亲合素与生物素特异性结合，游离的成分被洗去。加入显色底物（显色剂），若反应孔中有Insulin，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂变蓝，加终止液变黄。在450nm处测OD值，Insulin浓度与OD450值之间呈正

3、相关，可通过绘制标准曲线求出标本中Insulin浓度。检测原理示意图：http://www.excellbio.comEmail:tech@excellbio.com.Tel:(021)69839301Fax:(021)698393022试剂盒组成:名称96Tests48Tests保存条件1．抗体包被板条(MiceowellPlate)8×128×64℃2．标准品系列(Standard)6支（200ul/支）6支（100ul/支）4℃3．浓缩生物素化抗体100×(Biotin-Conjugate)1支(120ul/支)1支(60ul/支)4℃4．浓缩酶结合物100×(Strept

4、avidin-HRP)1支(120ul/支)1支(60ul/支)4℃(避光)5．试剂稀释液(AssayDiluent)1瓶（25ml/瓶）1瓶（25ml/瓶）4℃6．浓缩洗涤液20×(WashBufferConcentrate)1瓶（30ml/瓶）1瓶（30ml/瓶）4℃7．显色剂(SubstrateSolution)1瓶（12ml/瓶）1瓶（6ml/瓶）4℃(避光)8．终止液(StopSolution)1瓶（12ml/瓶）1瓶（12ml/瓶）4℃9．封板胶纸2张2张10．说明书1份1份试验所需自备试验器材:1.酶标仪(450nm检测波长滤光片，570nm或630nm校正波长滤光

5、片)2.高精度加液器及一次性吸头：0.5-10ul,2-20ul,20-200ul,200-1000ul3.微孔板振荡器,双蒸水或去离子水，坐标纸。标本收集:1.收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。2.血浆抗凝剂推荐使用EDTA。避免使用溶血，高血脂标本。3.标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。4.标本收集后若不及时检测，需按一次使用量分装，冻存于-20℃或-70℃电冰箱内，避免反复冻融。5.可根据标本的实际情况，做适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数)。注：血清或血浆样本一般不需要稀释，若样本含量﹥6.0ug/L时，建议用试剂稀释液将血清或血浆样本做1:10（V

6、/V，即5ul样本+45ul试剂稀释液）稀释后检测。计算样本含量时应乘以稀释倍数（10）。注意事项:1.试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品，其他成分不可冻结。2.标准品，浓缩酶标记抗体体积小，运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000rpm离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。3.从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液。4.不同批号的试剂盒组份不能混用（洗涤液和反应终止液除外）。5.充分轻微混匀对反应结果尤为重要，最好使用微量振荡器(使用最低频率)，如无微量振荡器，可

7、在反应前手工轻轻晃动酶标板，使加入孔中的反应液混匀。6.酶免试验中标准品和样本检测时建议作复孔。检测前准备工作:1.请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，以平衡至室温。2.将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:20)。未用完的放回4℃。3.试剂盒的标准品由6个不同浓度的溶液组成，它们的浓度分别是：6.0、3、1.5、0.75、0.38、0.19和0ug/L。http://www.excellbio.comEmail:tech@excellbio.com.Tel:(021)69839301Fa