小鼠 IL-1b Elisa试剂盒

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1、www.blkwsw.com小鼠IL-1β定量分析酶联免疫检测试剂盒本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-1β浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整,如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系，我们将提供力所能及的帮助。如您有其它需求，请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。IL-1β简介：白介素-1又称淋巴细胞激活因子,由IL-1α和IL-1β两种形式的多肽类细胞因子构成，与许多的细胞活性相关，包括增殖、分化以及凋亡,主要由血液中的单核细胞和巨噬细胞所产生,各种上皮细胞,内皮细胞和间

2、质细胞也能产生IL-1,但血液中的IL-1主要是由单核细胞和巨噬细胞所产生的IL-1β。由激活巨噬细胞产生的IL-1β，经蛋白酶-1酶解活化后，成熟的白介素-1分子可以诱导白介素-2的释放、促进B细胞成熟与增殖、诱导成纤维细胞生长因子活性，通过这些影响可以刺激胸腺细胞增殖，进而影响机体的免疫反应。研究表明白介素-1蛋白与炎症初始反应相关，起到调节因子的作用，通常被认为是内源性致热原；细菌的内毒素或者一些非细菌的炎症因子都会诱导IL‐1产生，然后被释放到局部组织，IL-1β含量升高表明机体内有组织损伤或者感染产生,如败血症等。对IL-1β的研究主要集中

3、在各种生理和病理免疫反应和炎症反应过程领域。检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠IL-1β的浓度。小鼠IL-1β捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的小鼠IL-1β会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-1β抗体后，抗小鼠IL-1β抗体与小鼠IL-1β接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂

4、，若样本中存在IL-1β将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，小鼠IL-1β浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IL-1β浓度。小鼠定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:组分规格预包被板12条或6条样本分析缓冲液1瓶5ml/3ml标准品稀释液10ml/5ml标准品2/1支(冻干)生物素化抗体1瓶10ml/5mlHRP连接的酶结合物1瓶10ml/5ml浓缩洗涤液20×30ml/瓶TMB底物1瓶10ml/5ml终止

5、液1瓶5ml/3ml封板胶纸3/2张说明书1份标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作：A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集；BeijingBLKWBiotechnologyCo.,Ltd.Tel:010-57158602/52872342blkwbio@blkwbio.comwww.blkwsw.comD.若待测样本不能及时检测，标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；3.标本应清澈透明，检测前样本中

6、如有悬浮物应通过离心去除；4.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。注：正常小鼠血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。注意事项:1.试剂盒请保存在2～8℃。2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。3.若标准品复溶后，请在三天内用完。4.底物请勿接触氧化剂和金属。5.加样时，请及时更换枪头，避免交叉污染。6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要，在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。8.室温反应，请严格控制在25～28℃。9.洗涤过程是至关重要的，洗涤不充分会使

7、精确度下降并导致结果误差较大。10.试验中标准品和样本检测时建议作双复孔。11.加样过程中避免气泡的产生。12.血清和血浆标本的检测时，检测抗体的孵育时间应适当延长。检测前准备工作:1.试剂盒自冰箱中取出后应置室温平衡20分钟；每次检测后剩余试剂请及时于2～8℃保存。2.将浓缩洗涤液用双蒸水或去离子水稀释(1份加19份水)。3.加入标准品稀释液0.5ml至冻干标准品瓶中使IL-1β终浓度达到1000pg/ml，静置15分钟后轻轻混悬待彻底溶解，用标准品稀释液倍比梯度稀释后依次加入检测孔中。（标准曲线取七个点，最高浓度为1000pg/ml,标准品稀释液

8、直接加入作为0浓度.）洗涤方法:自动洗板机或人工洗板：每孔洗涤液为300ul，注入与吸出间隔15-30秒。洗