颇尔实验室转印膜使用手册颇尔

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1、颇尔实验室转印膜使用手册上海摩速科学器材有限公司销售021-56902220颇尔过滤器(北京)有限公司颇尔简介颇尔生命科学(PallLifeSciences)提供类型广泛的高分子膜,用于蛋白质和核酸的转移和检测过程。这个小册子对这些膜进行了描述,并给出了选择最好的膜用于特定的应用,并提供了基本的膜使用流程。这些膜也可以和很多商业化的检测试剂盒一起使用。特殊的应用可以对这些流程进行修改。要得到更多的帮助,请联颇尔生命科学当地技术服务部(列于书后)或者访问我们的网页www.pall.com/lab。上海摩速科学器材有限

2、公司销售021-56902220目录Contents颇尔生命科学的膜产品…………………………01用BioTraceNT膜和PVDF膜蛋白转移Biodyne尼龙膜…………………………………01(Western杂交)…………………………………12BioTrace™NT膜…………………………………01蛋白转移和固定使用的溶液………………………12颇尔PVDF膜………………………………………01转移过程……………………………………………13UltraBind™膜……………………………………01免疫检测的一般流程………………

3、………………13膜选择指南…………………………………………02用碱性磷酸酶和5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸/硝基四氮膜处理的普遍建议………………………………04唑蓝(BCIP/NBT)检测……………………………13核酸转移用溶液…………………………………05用辣根过氧化物酶和二氨基联苯胺检测…………13核酸转移的流程…………………………………05用辣根过氧化物酶和氯奈检测……………………14用Biodyne膜进行DNA点杂交…………………05酰胺黑染色…………………………………………14用Biodyne膜转移DNA

4、(SouthernBlot)…06胶体金染色…………………………………………14电泳准备转移的凝胶……………………………06考马斯亮蓝染色……………………………………14颇尔改进碱转移法…………………………………06PonceauSReversibleStraining………………14用Biodyne膜转移RNA(NorthernBlot)………07问题解答指南-蛋白转移………………………15用BiodyneA膜影印培养,克隆挑选和噬菌斑挑选07BiodyneC型膜的活化………………………………16用Biodyne

5、A膜挑选克隆和噬菌斑………………07氰尿酰氯(cyanuricchloride)活化…………………16用BiodyneA膜影印培养和扩增…………………07DCCD二环己基碳二亚胺Biodyne膜的固定过程……………………………08(dicyclohexylcarbodiimide)活化…………………16Biodyne膜的杂交过程………………………08戊二醛(glutaraldyhyde)活化………………………16预杂交………………………………………………08把蛋白质固定到UltraBind膜………………………17杂

6、交…………………………………………………08湿点法固定…………………………………………17杂交溶液……………………………………………08灌流法固定(SlotBlotting)………………………17杂交后的漂洗………………………………………09封闭和检测的建议…………………………………17放射自显影…………………………………………09问题解答指南-UltraBind膜……………………18重新杂交……………………………………………上海摩速科学器材有限公司销售09参考资料……………………………………………19甲酰胺洗脱(

7、DNA转移)………………………09021-56902220其他可能用到的产品………………………………19用煮沸的SDS洗脱………………………………10碱法洗脱……………………………………………10Biodyne®转印膜………………………………20BioTraceTMNT纯硝酸纤维素转印膜…………甲酰胺洗脱(RNA转移)…………………………1022问题解答指南-核酸…………………………11FluoroTrans®PVDF膜………………………23BioTraceTMPVDF转印膜蛋白的转移和固定……………………………1

8、2…………………………24颇尔生命科学的膜产品Biodyne尼龙膜Biodyne尼龙6,6膜提供了出色的分辨率,高敏感性和低背景。Biodyne膜生产出来就是亲水的,不需要提前润湿。它们能达到严格的分子生物学应用的标准,比如法医学检测。当用于多次的杂交,洗脱和重新杂交,这些膜不会皱缩,开裂或撕裂。能提供四种不同的化学表面,用于不同的应用。(更多信息见选择图表

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