桃线粒体DNA多态性及其与抗寒性的关系

《桃线粒体DNA多态性及其与抗寒性的关系》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、分类号：$662．1UDC：634．2密级：单位代码：10798桃线粒体DNA多态性及其与抗寒性的关系MitochondriaDNAPolymorphismandItsRelationshipwithColdHardinessinPeach[Prunuspersica(L．)Batsch】二级学科：果树学研究方向：果树遗传育种研究生：赵慧敏指导教师：张立彬教授于凤鸣教授所在院所：园艺科技学院2013年6月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢之处外，论文中不包含其他人已经

2、发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑兰堡壹墼隆堙整堂睦或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：赵叁．张＼、签字日期：刀f弓年彳月2／日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑兰垦越竖塾鲎睦有关保留、使用学位论文的规定。特授权塑兰垦趑堙整堂睦可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘。(保密的学位论文在解密后适用本授权

3、说明)学位论文作者签名：赵丛．k导师签名：谘够彬签字日期：玉B年石月二1日签字目期：加『多年‘月2，f曰缩略词摘要通过建立桃叶线粒体DNA提取方法、利用PCR扩增和生物信息学分析等手段，对具有不同抗寒能力的桃品种间线粒体DNA多态性是否与抗寒性相关进行了探讨。寻找细胞质(线粒体)中与树体抗寒力紧密连锁的分子标记，对桃树抗寒的辅助选择育种及进一步提高对抗寒性进行早期鉴定及提高亲本选配的准确性具有重要意义。主要试验过程与结论如下：1．通过差速离心、蔗糖衬垫及线粒体超活染色的方法对桃叶片线粒体进行了分离，成功的从线粒体中得到了完整、可满足后续试验要

4、求的线粒体DNA。该提取体系的建立填补了桃叶线粒体DNA提取技术的空白，为从核外遗传角度进行分子生物学研究工作奠定了基础。2．以经过2009年冬天自然筛选的有明确抗寒分级的21个品种(珲春桃、贵州毛桃、GF677、曲枝山桃、瑞光27号、早霞露、奉化玉露、中华寿桃、阳泉肉桃、吉林8701、吉林8801、Mafim、寿红、红港、Vallegrande、DesertRed、五月火、中宁3号毛桃、深州白蜜、黄金蟠桃、青丝)的桃叶片为试材，用PCR扩增与直接测序法对线粒体DNA上的atp9、atp4(orf25，)、coxI、coxlII、18s一如r

5、Rl~H、SSU、nad4exonl／2部分基因序列进行扩增与测序分析，寻找特异基因片段的多态性与品种抗寒性的关系。结果表明：在首次得到的桃线粒体DNAatp9、atp4(orf25)、coxI、coxlII、18s．5srrna、nad4exonl／2部分基因序列与氨基酸序列基础上，发现除ATP9基因片段外，其余基因的序列均一致。3．位于atp9基因序列开放性阅读框上游非编码区的一96咿一94bp处G碱基的缺失与否，可将桃抗寒与不抗寒品种区分开来，准确率达81％。推测G碱基的缺失可能影响到atp9基因转录过程中产生的单链RNA结构或atp9

6、基因表达的调控。关键词：桃；线粒体；线粒体DNA：抗寒：多态性ⅡABSTRACTThroughthesimpleextractionofpeachmitochondrialDNA(mtDNA)，bioinformaticsanalysisandPCI乙MitochondriaDNAPolymorphismandRelationshipwithColdHardinessinPeachwerestudyedmitochondriaDNApolymorphismandrelationshipwithcoldhardinessinpeach(Prun

7、uspersica(L．)Batsch)．Itisveryimportanttofindmolecularmarkerlinkedtothetreecoldhardinessinthecytoplasm(mitochondrial)．Itisveryhelpfultoselectbreedingofpeachtreeandidentifyandimprovetheaccuracyoftheearlyselectionofparents．Thereweresomechiefprocessandconclusionasfollows：TMsstu

8、dyinvestigatedareproducible．simpleandconvenientmitochondrialDNAisolationmethodviad