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1、第42卷第6期海洋与湖沼Vol.42,No.62011年11月OCEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICANov.,2011大菱鲆(Scophthalmusmaximus)胚胎发育的*形态学和组织学研究1,2,31111,3佟雪红马道远徐世宏刘清华赵春彦111①肖志忠肖永双李军(1.中国科学院海洋研究所青岛266071;2.盐城师范学院生命科学与技术学院盐城224002;3.中国科学院研究生院北京100049)提要采用显微镜和连续切片技术,观察了大菱鲆胚胎发育阶段的形态学和组织学特征。结果表明,大菱鲆胚胎发育主要经历6个时期;在14℃,胚体经108h
2、即可孵化出膜。胚胎在64细胞期出现纬裂,分裂球分化为外层的包被层和内部的深层细胞;多细胞期形成卵黄合胞体层;低囊胚期形成囊胚腔。受精后26h30min胚盾出现。胚盘下包65%时,头突出现;下包90%时,神经索和体节形成;下包完全时,脊索原基形成。受精后59h35min,克氏囊出现;72h消化管出现;74h前肾小管形成;82h脊索部分细胞发生“真空化”;89h克氏囊退化消失,胚胎消化管的后端出现纤毛;94h胚体的心跳开始。初孵仔鱼鳍褶上形成特有的色素丛。关键词大菱鲆,胚胎,发育,形态学,组织学中图分类号S917大菱鲆(Scophthalmusmaximus)属鲆科于
3、大菱鲆早期阶段的生物学和形态学特征,而其胚(Bothidae)、菱鲆属(Scophthalmus),自然分布于东北胎发育阶段的组织学研究报道较少。本文在形态学的大西洋沿岸。我国自1992年引入大菱鲆以来,经过基础上,从组织学角度系统地探讨了大菱鲆胚胎发十几年的发展,大菱鲆的工厂化养殖已成为我国一育过程的器官形成,为探明大菱鲆早期发生、发育规项新兴产业,推动了我国海水养殖第四次浪潮的形律提供理论参考。成和发展(马爱军等,2009;雷霁霖等,2003)。1材料与方法关于大菱鲆早期阶段的发育特征,国内外已有一些报道。雷霁霖等(1995,1998,2003)对大菱鲆胚胎实
4、验中所用大菱鲆(Scophthalmusmaximus)胚胎和仔、稚鱼发育以及大菱鲆的健康养殖进行过详细研取自山东烟台东方海洋科技股份有限公司。采用腹部究,马爱军等(2001,2002)对大菱鲆产卵特性及饵料挤压法获得若干亲鱼成熟的卵子和精液,通过人工对大菱鲆幼鱼生长的影响进行了探讨,Padrós等受精获得受精卵。将质量较好的浮性卵移入孵化网箱(1996)分析了大菱鲆早期发育阶段淋巴器官的发生,中进行孵化。孵化时水温为14℃,盐度30—32,pHAnderson等(1993)研究了饵料成分对大菱鲆生长和7.7—8.0。用显微镜进行连续观察,拍摄胚胎发育的生化指标的
5、影响,Al-Maghazachi等(1984)通过形态学照片,记录胚胎发育的时间。同时在每个发育时期分和头骨发育,对大菱鲆仔、稚鱼的发育进行了分期,别取一定量的胚胎样品,Bouin’s液固定,石蜡包埋;并详细描述了各期的发育特征等。上述研究主要侧重用KD1508A轮转式切片机(浙江金华仪器有限公司*现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目,nycytx-50号;国家高技术研究发展计划(863)项目,2006AA10A404号。佟雪红,博士,E-mail:txh113005@163.com①通讯作者:李军,研究员,博导,E-mail:junli@ms.qdio.ac
6、.cn收稿日期:2010-04-29,收修改稿日期:2010-06-276期佟雪红等:大菱鲆(Scophthalmusmaximus)胚胎发育的形态学和组织学研究845生产)进行连续切片,切片厚度为4m,H.E染色,中性树胶封片,NIKONSMZ-800显微镜下观察,照像。2结果2.1受精卵大菱鲆卵无色透明,含有一个油球,平均卵径为0.97mm。大菱鲆卵与精子结合后,出现受精膜,约经2h原生质开始向动物极集中形成盘状的胚盘,此时动物极向下,植物极朝上。质量较好的受精卵漂浮在海水表面,而未成熟、未受精的卵或坏卵呈乳白色。2.2卵裂期2h30min胚盘细胞质发生首次
7、经裂,产生2个等大的分裂球(图1a)。在显微镜下,中心粒和纺锤丝清晰可见。2h55min第2次分裂沟与第1次垂直经裂成大小相等的4个分裂球(图1b)。3h35min第三次分裂产生垂直于第二次分裂沟的两个分裂面,位于第一次纵裂沟左右两侧,分成大小不等的8个细胞(图1c)。4h5min第四次分裂也产生两个分裂面,位于第二次分裂面的两侧,并与第一次和第三次分裂面相垂直,分裂成16个分裂球,包括4个中央细胞和12个边缘细胞(图1d)。4h55min第五次卵裂出现四个分裂面,与第一、第三分裂面平行,而与第二、第四分裂面垂直,产生32个分裂球,形状和大小变得不规则(图1e)。
8、6h20m