《化学发光免疫分析》PPT课件

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1、化学发光免疫分析技术与临床应用化学发光免疫检测技术起源Halman在1977年基于放射免疫分析的基本原理，将酶的化学发光与免疫反应结合起来，建立了化学发光免疫分析方法。(Chemiluminescenceimmunoas)什么是化学发光？人体内的某些化合物分子被氧化后，可以形成激发态并返回基态同时发射光子，这就是化学发光。化学发光免疫检测技术是利用发光信号测量仪器测量光量子的产额。该技术可以有效的消除样本的本底干扰，消除样本对光信号的散射，从而获得更高的检测灵敏度。化学发光免疫分析原理：免疫反应系统：将发光物质（在反应剂激发下生成激发态中间体）直接标记在抗原（化学发光免疫分析）或标记抗体

2、（免疫化学发光分析）上，或用酶作用于发光底物。化学发光分析系统：利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化，形成一个激发态的中间体，当这种激发态中间体回到稳定的基态时发射出光子（hv)，利用发光信号测量仪测量光量子的产额，就可测知体内某些微量生物活性物质的含量。化学发光免疫分析类型：根据标记物的不同分为三大类：1、化学发光免疫分析2、化学发光酶免疫分析3、电化学发光免疫分析化学发光免疫检测技术：优点：安全，灵敏度高（10-15g/ml），稳定性好，重复性较佳，结果漂移小，线性较好，准确度高，操作方便，试剂货架期长（半年~1年），浪费少，出结果快速。缺点：仪器价格昂贵，试剂成本较高，目前有

3、些检测项目不能用化学发光检测，待开发。化学发光技术与其他免疫分析技术比较：免疫诊断技术在经历了放射免疫法、酶标免疫法、免疫荧光法等方法后，发展到今天，化学发光技术的出现并临床应用，为现代医学免疫诊断技术的发展奠定了一个划时代的里程碑。.1、放射免疫法：1、放射免疫法缺陷：同位素半衰期短（125I半衰期60天）及需要特殊水源处理装置，污染问题、试剂有效期短、出报告时间长（一般要2天）、标准曲线稳定性差，但在有些发达国家仍在使用，完全能满足临床需要。2、酶标记免疫分析缺陷：由来已久，但是始终没有能够替代放射免疫。这种依靠比色法或偏振光法的检测技术所受的干扰因素太多，甚至试管的形状的变化都会影响

4、实验结果，灵敏性、稳定性、重复性均较差（可测灵敏度为10-8g/ml）。3、荧光免疫分析技术缺陷：利用特定波长的入射光将分子转换到激发态，然后分子回到基态并发射光子。但有以下干扰因素：1）血清样本中存在内源性荧光带，会增强非特异性本底荧光；2）样本对荧光光信号的散射也干扰实验结果。化学发光免疫检测技术临床应用：1、甲状腺功能类：T3、T4、THS、FT3、FT4、rT3、TG、T-PO新生儿筛查：T4sTSH2、性腺激素类：HCG、ß-HCG、FSH、LH、E2、E3、PRL、P、T、GH等3、肿瘤检测：CEA、AFP、Fe、PSA、CA125、CA153、CA199CA50、CA211、

5、CA7244、心血管：CK-MB、BNP、Tn-I、Myoglobin5、贫血类：铁蛋白、ViteB12、叶酸6、药物浓度：地高辛、洋地黄、托普霉素可马西平、苯巴比妥、等7、糖尿病及代谢：胰岛素、C-肽、PTH8、过敏源类：过敏源筛选、总过敏源9、传染病：肝炎系列、风疹、弓形体10、其他：皮质醇、还有很多待开发项目。心血管系统:如何能更快更准确更全面的诊断AMI时心电图并不能典型归类诊断急性心肌梗塞有一定难度一半有不稳定胸口窒息痛的病人，入院时心电图并不典型。病人再发梗塞诊断困难导致不能及时诊断AMI延误及时治疗、护理临床需要尽早准确诊断AMI方法肌肉组织心肌心肌细胞特异性标志肌钙蛋白IC

6、T肌钙蛋白I释放入血心肌坏死（氨基酸顺序40％差异）心肌细胞肌红蛋白肌酸激酶MB心肌坏死释放入血（含量大）血液浓度明显升高(CK-MB)65432104812162024487296h肌红蛋白CK-MB肌钙蛋白浓度急性心肌梗塞后各项指标变化肌红蛋白升高高峰回落肌酸激酶MB肌钙蛋白I1-2h4-8h6-8h5-12h10-24h12-24h18-30h48-72h5-7d肌红蛋白的临床意义早期诊断特异性低灵敏度高急性心梗后最早(1-2h)出现的标记最早能排除非急性心梗阴性预测率为99%体内周期短，对再发梗塞特别灵敏肌红蛋白测定能有效分辨非急性心梗，使急性心梗病人能尽早得到治疗.有效观察溶栓

7、疗效肌钙蛋白I的临床意义诊断急性心肌梗塞特异性>98%特异性强、确诊率高灵敏度低急性心梗发病后6h才出现，应与肌红蛋白一同使用肌钙蛋白I升高即可确诊为急性心肌梗塞，及时得到治疗体内周期长，对外地病人延误求诊亦能诊断对极轻微的心肌创伤都能检出胸痛ECG发病肌钙蛋白I肌红蛋白CK-MB急性心梗+–++<8h>8h随访+再发心梗肌红蛋白注意事项肌酸激酶MB骨骼肌损伤肌红蛋白升高肾功能衰竭CK-MB增高甲状腺功能系列诊断：T