拟除虫菊酯类杀虫剂氯氰菊酯和氰戊菊酯对牙鲆鳃细胞系FG的细胞毒性研究

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1、中国海洋大学硕士学位论文拟除虫菊酯类杀虫剂氯氰菊酯和氰戊菊酯对牙鲆鳃细胞系FG的细胞毒性研究姓名：兰欣申请学位级别：硕士专业：海洋生物学指导教师：张士璀;郭华荣2003.6.11拟除虫菊醅类杀虫剂氯氰菊稚和氰戊帮龋对牙鲆鳃纲胞系FG的细胞堡竺里堕拟除虫菊酯类杀虫剂氯氰菊醮和氰戊菊醢对牙鲆鳃细胞系FG的缨胞毒性研究中文摘要秘麓体井壤舞豹鱼类缨貔对环境毒物进弦污染捡测帮安全镶评徐是一转麓便易行，瑟虽毒性圣#埂燮妻接豹捻测方法，戏为焦类缨腿壤莠的重要用途之一。杀虫剂是水环境污染的一个重要污染源，拟除虫菊酯(pyrettu'oid)是一类新型广谱帔杀虫荆，因其具有鹊

2、效、低毒、低残鹭和环境相黎性好的特点，在生产中已经逐步取代剧毒的有机磷农药。本文利用本实验室所建立的海水鱼细胞系FG为靶细胞，建立了一个检测拟除虫菊酯类杀虫剂污染物细胞毒性效应的快速检测系统。本文采用显微摄影、目微尺计数法、中性红法(NR)、氮唑菔法(MTT)、细胞蛋臼分析法和电镜等方法研究了拟除虫菊醑类杀虫剂氯氰菊醑和氰戊菊酯对体外培养FG细胞的细胞毒性效应。氯鬣麓酯(cypermethrin)燕浅莺仅次予氰戊菊酸静第二大缀除盎菊醚类杀虫剩。氯氯装酶辫牙辩蟋缨德系您瓣缨黪毒後研究结暴表骧：1)氯鬣菊致可造成聪缨髓形态豹改变。处理浓度砖l拜g／ml，处壤对阉

3、为48小越款愆绷胞就不再呈长梭形充分传展状态，开始圆缩变麴，处理7天后，鳃跑透明度明显降低，多数细胞回缩变圆，甚至从培养瓶底部脱落，悬浮在培养基中。2)氯氰菊酯对FG细胞生长速度的抑制。FG细胞缝氯氰菊酝处理48小时詹，在所有的实验浓度下FG细胞的生长速度均受到抑制，髓随氯氰菊酯处理浓度的增加，所受毒性越大，足现浓度依赖性：生长曲线也说明FG细胞的生长被氯氰菊酯的抑制呈现出时间依赖性。3)NR、MW与细胞凝白分析法得出氯氰菊酯对FG缩脆的{e；o德分剐为11．4、12．2和12．4ltg／ml。三军率测试系统的细胞毒性黪稽关性镶嵩，并不裰测试终点不同粝不黼。

4、Ekwall认为当瑶依赖于纲施基本结构积功缝瓣不阉测渡终点捡测缨熬毒蛙越，大部分黥缨羟系对予毒耱蠢类似的反应，我们豹缕果与Ekwalt的观点是吻合的。幽予在氯氯楚酸瓣最低受试浓度Ipg／ml对FG细胞就商毒性，且随着作用浓度的增大，纲胞所受的海性媳拟除虫菊酯类杀虫剂氯氰菊酯和氰戊蒲酾对牙鲆鳃细胞系FG的细胞毒性研究增大，表现为浓度和时间依赖性。这说明FG细胞对氯氰菊酯很敏感，FG细胞有可能成为检测氯氰菊酯急性毒性的合适的生物指标。4)电镜结果显示，经l肛g／ml氯氰菊酯处理48小时后，核膜部分溶解，多数线粒体肿胀，嵴局部瓦解，严重者形成大的电子透明区，粗面内

5、质网的膜膨胀，形成膨大的小泡，表面的核糖体脱落游离于胞质中，可看到胞内出现许多空泡区。氰戊菊酯(fenvalerate)是我国产量最高的一种拟除虫菊酯类杀虫剂。氰戊菊酯对牙鲆鳃细胞系FG的细胞毒性研究结果表明：1)处理浓度为l肛g／ml时，FG细胞的形态和生长基本不受影响。2)处理浓度为5肛g／ml时，FG细胞形态丌始发生明显改变。处理48小时后，FG细胞不再呈长梭形充分伸展状态，胞质逐渐回缩变圆，处理7天后，细胞透明度降低，细胞层甚至从培养瓶底部脱落。3)氰戊菊酯对细胞生长速度的抑制。处理48小时后，在实验浓度5pg／ml、lOpg／ml和15斗g／ml下

6、，细胞生长速度均受到抑制，并且随着氰戊菊酯浓度的增加，细胞所受毒性越大，呈浓度依赖性；生长曲线表明FG细胞的生长受氰戊菊酯的抑制，呈现出时间依赖性。4)NR、MTT与细胞蛋白分析法得出氰戊菊酯对FG细胞的IC；。值分别为15．68、16．49和16．66pg／ml。三种测试系统的细胞毒性相关性也很高。5)电镜结果显示，经5Bg／ml氰戊菊酯处理48小时的FG细胞中，细胞核的结构无明显变化，而线粒体的结构受到严重损伤，线粒体肿胀且嵴减少，同时粗面内质网的膜膨胀，形成膨大的小泡，粗面内质网表面的核糖体脱落于胞质中。这是海水鱼细胞系首次应用于拟除虫菊醑类杀虫剂的细

7、胞毒性检测。研究结果表明海水鱼细胞系FG可作为一个有效的体外筛选系统，用于检测和评价环境污染物对鱼类细胞的毒性效应。关键词牙鲆鳃细胞系，体外细胞毒性，氯氰菊酯，氰戊菊酯2垫堕垒堕塑耋墨皇型塑墼苎塑塑笾感煎墼塑要塑塑塑望墨堕堕塑堕童丝堡塞一——InVitrostudyoncytotoxiceffectsofthepyrethroidinsecticideofcypermethrinandfenvalerateonthegillcelllineFGoftheflounder(PARALICHIHYSOLIVACEUS)AbstractCellcultureoff

8、ishhasprovidedUSanimportan