奥曲肽抑制大鼠角膜新生血管的实验研究

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1、华中科技大学硕士学位论文奥曲肽抑制大鼠角膜新生血管的实验研究姓名：刘新平申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：丁正平2003.4.11忙中科技人学同济医学院坝．L学位论文奥曲肽抑制大鼠角膜新生血管的实验研究华中科技大学同济医学院附属协和医院硕士研究生导师摘要刘新平丁正平教授肼，巧，zR，)’z2目的研究大鼠角膜碱(氢氧化钠)烧伤后角膜新生血管(cornealneovascularization，CNV)形成过程的变化与血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)表达的变化这二者之间的关

2、系，以及奥曲肽(octreotide)对角膜新生血管形成过程及血管内皮生长因子表达的影响，探讨血管内皮生长因子与角膜新生血管之间的相关性，奥曲肽是否能抑制角膜碱烧后角膜新生血管的形成过程及奥曲肽影响角膜新生血管形成过程的作用机制。，方法实验组及对照组各42只大鼠，另3只大鼠作为正常对照，用1mol／LL氢氧化钠烧伤实验组及对照组全部右眼(共84眼)角膜，建立大鼠角膜碱烧伤后角膜新生血管形成的动物模型。实验组伤眼球结膜下注射奥曲肽1ug，每同一次，共7天，对照组不用药物治疗。鼠眼角膜碱烧伤后，两组每天各随机抽取6只大鼠，在带照相机的显微

3、镜下观察每只伤眼角膜新生血管形成过程的情况，并照像记录，同时在显微镜下用双脚规．定量测定每只烧伤眼最长角膜新生血管长度，测量时以连续弯曲度小，角膜新生血管朝向角膜混浊中心生长的最长血管为准。每只伤眼的照片资料进行计算机图像分析定量测定角膜新生血管生长面积。取伤眼角膜标本石蜡包埋，切片后行血管内皮生长因子免疫组织化学染色和H．E染色，免疫组织化学染色后的切片在显微镜下观察并进行计算机图像分析，定量检测每张切片炎性细胞表达的血管内皮生长因子积分光密度(integrationopticdensity，IOD)。计量资料用均数x华中科技大学同

4、济医学院硕一L学位论文±标准差s表示，单因素方差分析t检验，P<0．05作为差异有显著性。H．E染色切片在光镜下观察其病理变化。结果角膜碱烧伤24小时后即第1天，实验组和对照组伤眼角膜上即都有新生血管出现，第2天较明显，第3天最长角膜新生血管长度，角膜新生血管面积达到峰值，从第1天至第7天，与对照组比较，实验组奥曲肽对最长角膜新生血管长度抑制率分别是31．87％、50％、49．90％、37．46％、33．47％、36．54％、34．52％，对角膜新生血管面积抑制率分别是36．20％、44．07％、49．24％、53，50％、53．59

5、％、47．84％、6118％。正常角膜组织未见VEGF蛋白的表达，伤后第1天角膜上即可检测到VEGF蛋白，第3天VEGFIOD值亦达到峰值，从第1天至第7天，与对照组比较，实验组奥曲肽对VEGFIOD抑制率分别是30．75％、33．87％、47．96％、31．13％、32．07％、25．7％、20．99％。在不同时间点上，实验组最长CNV长度、CNV面积、VEGFIOD均显著少于对照组、／(P<0．01或P<0．05)。p，结论VEGF与CNV生长有明显的时间相关性，奥曲肽能降低角膜VEGF蛋白水平，有抑制CNV形成的作用，其机制可能

6、与抑制炎性细胞表达VEGF有关。关键词奥曲肽角膜新生血管血管内皮生长因子化学伤免疫组织化学计算机图像分析华中科技人学剧济医学院{硬J。学位论文Anexperimentalstudyofanti—angiogenesiswithoctreotideinratcorneaPostgraduateLiuxinpingTutorProfDingzhengpingDepartmentofophthalmology，UnionhospitalofTongJimedicalcollegeHuazhonguniversityofscienceandt

7、echnologyAbstractPurposeToinvestigatetherelationshipbetweencornealneovasculariaation(CNV)andvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)andtostudytheeffectsofoctmotideonCNVMethodsEighty-FourSprayue—Dawley(SD)ratswereburnedontheirrighteyesbyImol／LNaOHfor20secondstOsetupthemodel

8、ofCNV．Animalswererandomlydividedinto2groups，42ratsineachgroup．TheratsintestgroupwereadministeredasubconjunctiV