胎儿骨髓间充质干细胞在体外向软骨组织分化的探讨

《胎儿骨髓间充质干细胞在体外向软骨组织分化的探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、遵义医学院硕士学位论文胎儿骨髓间充质干细胞在体外向软骨组织分化的探讨姓名：洪嵩申请学位级别：硕士专业：骨外科指导教师：廖文波2003.5.15胎儿骨髓间充质干细胞在体外向软骨组织分化的探讨研究生洪嵩导师廖文波摘要目的探讨骨髓间充质干细胞(mesenehymalstemeells,MSCs)无支架条件下在体外向软骨组织定向分化的条件。方法取引产胎儿骨髓悬液，经Percoll密度梯度离心，获取单个核细胞，细胞贴壁、扩增后，再以高糖DMEM(TGF邛15ng／m1)进行成软骨细胞预诱导，4．7天后获得成纤维样单层

2、贴壁的MSCs。以此MSCs为种子细胞，2x106个细胞离心成团，在TGF—Dl与IGF．I及其它辅助成分的协同作用下，体外培养3周后形成组织团块。经固定、包埋、切片后行甲苯氨蓝染色，免疫组化方法测定特异性Ⅱ型胶原。通过图象分析软件检测组织块蛋白多糖和Ⅱ型胶原表达强度，并与胎几正常软骨比较。结果胎几骨髓单个核细胞经过预诱导，细胞表达特异性Ⅱ型胶原，甲苯氨蓝染色蓝染明爨增强；孬经离心威鬻、体外诱导培养嚣澎藏有毙泽软骨群缎家块，其甲苯氨蘸染色爨蓝絷，特异性II型胶愿戈豳性表达，隧黎分析表明其蛋由多糖及Ⅱ型胶原表

3、达强度与胎儿正常软骨相似。结论胎几骨髓间充质干细胞经商糖DMEM预诱导后可向软骨翻簏分托；离心戒霾蓐，在TGF。§1与IGF-I及英它骧黯残分瓣协慝作用下具有形成类软骨组织的能力，本实验建立酶定向诱导培养系统在无支架条件下可使MSCs向软骨样组织分化。荚键词：骨髓嗣一充质干细胞软骨细胞培养生长日子⋯⋯申鼙法分类号：R329。2交藏标谈霹：Theexplorationofchondrocyticdifferentiationofmesenchymalstemceilswithoutscaffoldinvirt

4、l"OHONGSon91,ANRong-ze2,LIAOWen-b03(1，2，3Departmentoforthopedics，zunyimedicalcollege,zunyi563003，China)Abstracts：ObjectiveToexplorethecultureconditionsthatchondrocyticdifferentiationofmesencchymalstemcellsinvirtro。Methods翟睦＆媾CSWereisolatedfromthenucleatedc

5、ellsfi'aetionofhumanembryonicmarrowwashingfluidbydensitygradientcentrifuge．AndthentheMSCswereinducedinto5choMroeytebyTGF-露l,dexamethascme,t0％FBSin瓣蘸鬈iuDMEMafteri焱thlcultureof10daysinlow霉娘DMEMJm'fialMSCsweretrypsinized，countedandcentrifugedto鑫smallpelletina

6、15mlpolypropylenetube；ThepeUetM蛳inducedintochondrocytictissue鼯limitedculWxeconditionsinvirtro．ResultsThehistologicalobservationofthecartilage-liketissueshowedpositivestainingoftduidinebluein3weeks。TheexpressionofthetypeIIcollagenWaSpos⋯itiv～etoo。TheseW翻t'e

7、s'mailartonatxn'aA狲揪磊蕊embryonicarticularcartilage。ConclusionsMSCse巍疆beusedasfunctionalcellstoconstructtissueengineeredcartilage。Theculturesystemcouldbeused埝induceMSCstocartilage-liketissuewithoutscaffoldmatexiaL[Keywords]MesenehymalstemcellsCaailageCulture

8、Growthfhetor警前言关节疾惠在临床上十分多觅，冀中籀辫六一鄣分是由于各种擦霞产生翡关节鼓臀破棼所致。关节软骨一旦搂馋，簿泼修复，目前临床常用的治疗方法仅能对症处理、缓解拄状、组织工程学家一直致力予用组织工程化软骨修复病损关节软骨Ⅲ。近年来，嚣髓闽充质子麴胞鑫英强大酶骞我更新、多囱分亿能力霭被篇徽鳃织王程化较嚣的释子细胞瞄^7，8，9l，嚣建囊一辣较好酶诱导培棼体系对于形成组织工程化软骨是至关重要的。以往