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1、万方数据专论与综述中国酿造2009年第4期总第205期·5·B一淀粉酶研究进展张剑幸,林庭龙,秦瑛,张开诚(武汉工业学院化学与环境工程系,湖北武汉430023)摘要:B.淀粉酶是一种外切糖化酶,植物中的13.淀粉酶活力高,因此在啤酒等工业中都使用由植物中获得的B.淀粉酶。文中从提取、纯化、活力测定、鉴定、酶学性质、决定最适酸度和温度以及应用和研究前景等方面综述了B.淀粉酶的研究进展。关键词:B.淀粉酶;提取;纯化;活力测定;酶学性质;氨基酸中图分类号:TQ925文献标识码:A.文章编号:0254—507
2、1(2009)0005—04ResearchdevelopmentonB—amylaseZHANGJian。,LINTinglong,Q玳Ying,ZHANGKaicheng(DepartmentofChemistryandEnvironmentalEngineering,WuhanPolytecludcUniversity,Wuhan430023,china)Abstnlgt:B—amylaseisakindofexonclease.BeerindusuyandothersextractB—amyla
3、sefromplants鹅itshi}ghactivityinplants.Inthispaper,the静searchdevelopmentofB—amylasewassummarizedintheaspectsofextraction,purification,determinationofffIlzymeactivity,appraisal,enzymaticproperities,optimalacidityandtemperature,applicationandstudyprospect.K
4、eywords:13-amylase;extraction;purification;determinationmethods;enzymaticproperities;8rninoacidB.淀粉酶(1,4.a.D.glucanmaltohydrolase,EC3.2.12)是一种外切型糖化酶,作用于淀粉时,能从Ot.1,4糖苷键的非还原性末端顺次切下一个麦芽糖单位,生成麦芽糖及大分子的B.界限糊精。由于该酶作用底物时,发生沃尔登转位反应(Waldeninversion),使产物由仅.型变为B.型麦芽
5、糖,故名【1卅B.淀粉酶。其广泛存在于大麦、小麦、玉米、大豆、甘薯等植物和一些微生物中[4-61。B.淀粉酶含量因植物不同而异,其中麦芽粉含量最高,大麦、小麦、大豆、麸皮也存在大量的p.淀粉酶,甘薯含量稍低。啤酒酿造可直接利用麦芽中的B.淀粉酶糖化,但许多高含量的麦芽糖产品,如高麦芽糖浆、结晶麦芽糖及麦芽糖醇等的生产需较纯净、活力高的B.淀粉酶。相比而言,麦芽是进一步提取0一淀粉酶的最好原料。许多微生物通过发酵也能生产B.淀粉酶,如Bacilluscirculat塔【7】、Bacillusmcgatcr
6、iumB6is]Xanthophyiiomyccsdendrorhous闻、Clos耐diumthcrmosulfurogenesSV2[9-101)、Rhizopusjaponicus、Streptomycessp.、Pseudomonassp.叫等。微生物发酵法生产的B.淀粉酶活力低,成本高。而来源于植物的B.淀粉酶活力高,因此在饴糖、啤酒等工业中几乎都使用由植物中获得的B.淀粉酶【嘲。本文论述了13.淀粉酶的提取、纯化、酶活力测定、鉴定、酶学性质以及决定最适酸度和温度的氨基酸、应用等的研究进展。1
7、p淀粉酶的提取从植物中提取13.淀粉酶分水提和油提2种嗍。油提法(甘油)与水提法相比,可大大缩短提取时问,还能延长酶的保存期,但前者成本高,故多采用水提法。水用量一般收稿日期:2008.11-21项目来源:湖北省教育厅项目(1320081801)作者简介:张剑(1970-),男,讲师,主要从事酶的研究与开发工作。控制为10:1(水料比),水提温度为50℃~55℃。一定量的还原剂可提高酶的提取率,这是因为13.淀粉酶的活性基团含有巯基,易与蛋白质形成二硫键而被屏蔽。此外,即使是游离的13.淀粉酶,巯基也很
8、容易与重金属盐(如Pb抖、A旷、Zn2+、Cua-)作用生成难溶性硫化物沉淀,导致失活。一些氧化剂(如Fe∞能将巯基氧化【3】。为此,提取时常加入EDTA、NaHSO,、Na2S03、巯基乙醇等以防重金属和氧化剂的干扰。表面活性剂有利于酶蛋白与原料分散,如向嗜热梭状硫细菌(Clostridiumthermosulfurogenes)的培养基中添加少量的表面活性剂(TritonX.100、CHAPS、Tween一80、sodiumtauroc
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