甲异靛治疗β地中海贫血的初步研究

《甲异靛治疗β地中海贫血的初步研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中山大学硕士学位论文甲异靛治疗β地中海贫血的初步研究姓名：陈环申请学位级别：硕士专业：儿科学指导教师：李文益2003.5.23中山大学硕士学饭论文甲异靛治疗口地中海贫哟翅查i!塞甲异靛治疗13地中海贫血的初步研究俺究背景串出大学孙逸铀纪念医院JL科硕士研究生：陈环导师：李文益教授摘要7蚤珠蛋自囊藏障褥矬贫盎，又称13遮串海爨盘(耱称t3逮贫)，跫～释零凳的慢性遗传性溶血性贫赢。13地贫对人类健康筑害很大，目前对本病的治疗尚j筝在一定潮难。离羹输赢加去铁治疗在西方发达阑家取褥了成功的经验，僮长期输血易会井铁沉积致多器官损伤以及输点传染病等副作用。造血予细胞移植是目蔚能根治本病的方法，但因供

2、体来源困难及费用昂贵，限制了它的广泛应用。基因娇委治疗痘是最理想熬澹疗方法，毽曩髓巍存焱妇毽麴建安全、蹇效豹羧钵以及如何保证目的慕因的稳定、高效表达等问题，离临床应用还有桐当长的距离。而瘦霜药物基因满控澹夥13遗贫，嚣其甄成本、低风陵、疹效较赘显等特焦，残受现阶段治疗13地贫的一种有较火临床意义的途径。§滤孛海贫矗蘸分子遗传学基穑爨f3珠蛋盎基因的缺陷戢缺失使t3珠蛋巍肽链合成受抑制。其病理生理綦础是类a链与类B链合成的不平衡状态，所以纠正珠蛋白肤链失衡成为母地贫治疗的一个重要仞入点。应用药物重新激活己关闭的Y珠蛋白基因，增热y珠蛋爨肽链的合成，从蠢纠正类a链与类璺链之闻的不平衡状态，减

3、轻临床瘟状，已被认为最目前治疗8地中海贫血的一种有效途径。嚣1；萋基援莲曩-T-娶建赘基因谲羧治疗憨菸兹奏5-爨袭黩营、羝糖魏萤、骂零I兰、羟基脲、丁酸类、曲古檬素、羿烟肼以及中药益髓生血灵等。假因部分药物毒副律用大，疗效维持对阗短，限麓了其在漆床静广泛应用。敲遴一步寻我低毒虽缀中山大学硕士学位论文甲摊靛治疗声地中海贫血的初步讲究济有效的B地贫基因调控用药，在现阶段对B地贫的治疗具有重要意甲髯靛对馒牲黢缨藏缝自盘癃豹疗效与Hu摆钕，餐毒戮{睾露毙外试验融证实甲异靛可以促进正常人及B地贫患者体外培养红系细胞Y珠蛋白基因转深。故本实验拟采用荧光宠爨RT-PCR殿珠蛋白肽链媳泳分析技术，进一步

4、骚究8逡贫惠JL暇孺率舅靛嚣类13豫蛋自蒸溺转录及类霉珠蛋自款链念成豹变化，为临床推广应用甲异靛治疗B地贫提供进一步的理论依据。

5、／实验方法：(、1．标本来源及相关临床资料B地中海贫血患儿：共9例，中位年龄3岁，均为中山大学附属孙逸仙纪医院，b摹毒门诊或住貔瘸久。溪有癍铡逡失拐诊瘸天或输盘羲，显来接受羟麓繇、马利兰镩药物治疗的患儿。9例患儿基因突变黧分别为：1341-42纯合子3例，13654／B4l_42双重杂含予2例，p654／9-28双徽杂合子2例，1317杂合予l例，13654莠g会子l铡。以上惠，强嚣震Me羲及骚焉赡分爰无藿袋煞EDTA-K。撬凝终周血2ml。2．实验方法2．1

6、类叠珠蛋巍mRNA含豢捡测①密度梯度离心法分离外周血单个核细胞；(至)TRIzol一步法掇取外周血单个核细腿中的惑RNA；⑨黔A克隆法铡餐定量阳性标准模板：@FQ·RT-PCR法进行RNA的反转录及eDNA的扩增，并同步检测类13珠蛋白mRNA含量。2。2类t3珠蛋自款链褶对含蹙分析①制备血红蛋白溶液；②溅定盘红蛋岛滚滚浓疫；③12％聚丙烯畿陂凝胶电泳分离珠蛋自肢链；④薄层色谱仪扫描定量。一Il一一髂0，e砂哪孛山走学磺毒学位论文甲募凝濑疼零戆孛篷塞壁塑鋈望堑塞3．统计方法：本实验资辩数据均_以；±SD表示，嚣组闻比较※建两组均数豹T检验，双侧假设检验n=O．05。全部数据以SPSS统计

7、软件褥出。结果：1．B地贫患JL,qt用甲异黻后临床症状的改善情况患，k骚翅荦异靛嚣，盎红蛋自会藿筠育不麓程度秀蹇，上舞蕹度必3g，l-159／l，平均上升6．59／l。不良反应轻微。2．甲异靛对嚣地贫患儿BmRNA含薰的影响恚，L藏麓甲：霉靛嚣§棚RNA含萋露甥显舞熹，毫摄药蓠程魄笼曼著性差筹(P>O．05)。3．甲异靛对叠地贫患儿ymRNA含爨的影响恚jk簸掰甲舅靛磊YmRNA含蠢餮燕舞毫(获6，40圭1．潞拜嵩至7．55±1．26)，与服骑前相比，麓别有显著性意义(P<0．01)。4．甲异靛对B地贫患儿§珠蛋白肽链楣对含量的影响患，L蔽溺甲异靛嚣登珠蛋宣获链穰jc圣含量无绢黧舞高，

8、与裰耱靛裙}E无最著性差异(p—O．736>0．05)。5．甲异靛对B地贫患儿y珠蛋白肽链相对含量的影嫡惠Jb骚瘸甲异靛器矗y、Gy珠蛋鑫获链福对含豢均有手}离。Ay获O．14士O．02升高至O．19+0．03，oy从O．16+0．03升高至0．2l±O．06，总Y珠蛋白肽链相对食量从0．30+0．04丹高至0．41+0．07。经t检验，差别有显藩缝意义(P