线栓法制备大鼠视网膜缺血再灌注模型的初步探讨

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1、线栓法制备大鼠视网膜缺血再灌注模型的初步探讨【摘要】目的建立一种理想的视网膜缺血再灌注动物模型。方法成年Wistar大鼠20只，除2只4眼作为对照组外，余18只36眼作为实验组,分为缺血1h组及缺血2h组，每组9只。实验中用预先制备的线栓插入实验组大鼠颈内动脉，造成视网膜缺血，分别于缺血1、2h后及再灌注6h后观察眼底，术后摘除缺血1、2h及再灌注6h的眼球进行组织学观察。结果实验组大鼠术后均发生视网膜缺血，视网膜苍白、水肿，以神经纤维层和内网状层最明显，可见白细胞浸润。再灌注6h后视网膜水肿减退，神经纤维层水肿减轻，造模成功。结论此方法比较接近视网膜缺血临床病理过程，模型稳定、可靠。【关

2、键词】模型动物视网膜缺血再灌注大鼠　　［ABSTRACT］ObjectiveToestablishanidealretinalischemiareperfusionanimalmodel.MethodsAsegmentofpreparedthreadwasintroducedintothecarotidarteryof18adultWistarratsandresultedinretinalischemiaof36eyes,whichwasfollowedby6hreperfusion.Funduschangesandmorphologicalchangesofeyeswereobser

3、vedafterischemiaandreperfusion.Accordingtotheperiodofischemia,the36eyesweredividedintotwogroups:group1,having1hischemia,group2,having2hischemia.Foureyesoftworatsservedascontrols.ResultsTheretinalischemiaresultedinretinalpallorand7edemawithleukocyticinfiltrate,especiallyinnervefiberlayerandplexifor

4、mlayer.Afterreperfusion,retinaledemaandnervefiberlayeredemabegantodecrease.ConclusionTheretinalischemiamodelestablishedinthisstudyissimilartothenaturalcourseofclinicalretinalocularischemia.Themodelisstableandreliable.［KEYWORDS］Models,animal;Retinal;Ischemia;Reperfusion;Rats视网膜缺血再灌注损伤是眼科常见的病理过程，严重影

5、响病人视功能。其发生机制十分复杂，已成为近年眼科的研究热点之一[1]。动物模型是研究视网膜缺血的重要途径之一。目前较常用的模型有两种：血管结扎模型及升高眼内压模型。理想的视网膜缺血再灌注模型应当是只阻断视网膜动脉或动静脉，而对视网膜其他部分组织没有任何损伤，而由于实验条件和技术的限制，目前尚无一种模型能够达到这一要求[2]。本实验旨在探索建立一种理想的视网膜缺血再灌注动物模型，努力使模型接近临床病理过程,为后续研究奠定基础。　　1材料与方法　　1.1材料健康成年Wistar大鼠（由青岛市药检所提供）20只40眼，雌雄不限，体质量220～250g，取2只4眼作为对照组，余18只36眼作为实验

6、组，随机分为缺血1h和缺血2h组,每组9只。术中所用器械为：市售普通2.0鱼线（直径0.237mm），704硅橡胶，砂纸，眼科常用30皮肤缝线，游标卡尺，动脉夹，电凝器。　　1.2方法　　1.2.1线栓制作　　①鱼线缠绕一约10cm×5cm硬性卡片，重物施压1～2d，以使鱼线变直；②将鱼线切成4cm长小段，一端用砂纸打磨约3～4mm，显微镜下观察表面有凹凸感即可，以方便挂胶；③将打磨好的鱼线蘸少许硅橡胶，立即在光滑的玻璃板上打磨，使橡胶在打磨端呈半透明的圆柱状；④将制备好的线栓自然气温下晾干，游标卡尺量取1.6、1.8cm长度并标记，挑选直径0.24～0.26mm线栓压直过夜备用。　　1

7、.2.2模型制作　　①水合氯醛（300mg/kg）腹腔注射麻醉大鼠，25g/L碘附消毒颈部皮肤，颈旁偏左0.3～0.5cm作长约2cm纵行切口，钝性分离出颈总动脉、颈外动脉及颈内动脉；②丝线结扎颈外动脉远心端，动脉夹夹闭颈总动脉近心端、颈内动脉远心端，并在颈外动脉靠近颈总动脉处预置一根缝线；③显微剪刀靠近颈外动脉结扎处近心端剪一斜口，插入线栓，打结预置缝线，不必太紧，剪断颈外动脉结扎处，向下逆转动脉，使之与颈内动脉呈一直