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1、祛疣酊渗漉提取工艺研究作者:王芳,高群,谈静,呼梅【摘要】目的通过正交试验优选祛疣酊最佳渗漉提取工艺。方法采用L9(34)正交试验,以丹皮酚和芍药苷含量、浸膏得率为考察指标,优选祛疣酊最佳渗漉提取工艺。结果正交试验筛选出最佳提取工艺为:加6倍量75%乙醇,浸泡24h,渗漉速度1mL/min。结论优选得到的提取工艺方法简单,药效成分提取率高,成本低。【关键词】祛疣酊;提取工艺;正交试验;丹皮酚;芍药苷;浸膏得率 Abstract:ObjectiveTooptimizetheextracttechnologyofQuyouTincturewi
2、thorthogonaldesign.MethodsWiththedeterminationofpeoniflorinandpaeonolandtheextractionratesasindexes,theextractconditionsofQuyouTincturewasoptimizedbyorthogonaldesign.ResultsTheoptimalpreparationprocessofalcoholwasasfollows:adding6timesalcohol(75%),immerse24hoursandpercolat
3、ewith1mL/min.ConclusionTheoptimumextractingconditionwassimple,withahighextractionrateandlowcost.8 Keywords:QuyouTincture;percolationextractprocess;orthogonaldesign;peoniflorin;paeonol;extractionrate 祛疣酊是由牡丹皮、乌梅、山楂等组成的外用中药复方制剂,有清热散结、收敛润燥的功效,临床主要用于治疗扁平疣、尖锐湿疣及毛囊炎等。祛疣酊的提取工艺采
4、用渗漉法,为考察渗漉提取效果,保证制剂质量,本试验以方中主药牡丹皮的主要有效成分芍药苷、丹皮酚的提取量以及浸膏得率作为评价指标,采用正交试验法优选祛疣酊的渗漉提取工艺。 1仪器与试药 HP-1100高效液相色谱仪(HP-1100系列二级泵,二极管阵列检测器,HPChemstation工作站,美国惠普公司);BP211D分析天平(Sartorius公司);AS10200超声波清洗机(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。芍药苷(批号0736-200219)、丹皮酚(批号708-9704)对照品由中国药品生物制品检定所提供。祛疣酊方中各药材由成都中
5、医药大学附属医院药剂科提供。乙腈色谱纯,水为重蒸馏水,其他试剂均为分析纯。 2方法与结果8 2.1正交试验优化提取工艺 2.1.1正交设计查阅相关文献[2-3],影响渗漉提取的主要因素是乙醇浓度、用量、渗漉速度和浸泡时间,故选择L9(34)正交表设计正交试验,分别以芍药苷和丹皮酚的含量(每克牡丹皮中芍药苷和丹皮酚的提取量)、浸膏得率为评价指标,正交设计见表1。表1提取工艺正交设计因素水平表 2.1.2正交试验结果按祛疣酊处方取各味药材,依照正交试验设计方案进行试验,合并渗漉液,得9份正交试验样品。精密吸取各正交试验样品2mL,加甲醇
6、稀释至10mL,混匀,滤过,精密吸取10?L,按上述色谱条件测定渗漉液中芍药苷和丹皮酚的含量,并按总体积算出每克原药材中提取成分的量。取正交试验样品1/10体积量,置恒重的蒸发皿中,105℃干燥至恒重,放冷,测得干浸膏的量,计算浸膏收得率。将以上测定结果作为评价指标进行综合评分,结果见表2,方差分析见表3。表2正交试验结果分析表注:采用综合加权评分对试验结果进行分析。浸膏收率评分=(20/最大浸膏收率)×浸膏收率;芍药苷含量评分=(40/最大芍药苷含量)×芍药苷含量; 丹皮酚含量评分=(40/最大丹皮酚含量)×丹皮酚含量;综合评分=浸膏收
7、率评分+芍药苷含量评分+丹皮酚含量评分表3方差分析表注:F0.05(2,2)=19.00,F0.01(2,2)=99.008 由试验结果的直观分析及方差分析可知,影响渗漉提取效果的因素顺序为:A>C>D>B,A(乙醇浓度)对渗漉提取效果有显著影响(P<0.05),C(流速)和D(浸泡时间)对提取效果不显著。由直观分析最佳提取工艺为:A2B3C3D1,鉴于B(乙醇用量)因素对提取效果无显著影响,为节约成本,将B3调整为B1,优选提取工艺为A2B1C3D1,即药材加6倍量75%的乙醇,浸泡12h,渗漉速度1mL/min
8、。 2.1.3验证试验按正交试验优选的提取工艺条件A2B1C3D1进行重复性验证试验,结果见表4。 从重复性验证试验结果可见,优化条件提取结果芍药苷含量、丹皮酚含量、浸膏收率