发酵法生产真菌多糖及真菌多糖在食品中的应用

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1、发酵法生产真菌多糖及真菌多糖在食品中的应用冠生园(集团)有限公司技术中心李爽、周晓燕一.大型真菌简介冬虫夏草、蛹虫草、灵芝、云芝、猪苓、灰树花、姬松茸二.真菌多糖的作用多糖是醛糖或酮糖通过糖苷键连结在一起(一般在10个以上)的多聚物,是一切有生命的有机体必不可少的成分,是生命的活性物质。真菌多糖在60年代以后发现具有免疫促进作用而引起人们的极大兴趣。从药食两用真菌中提取的多糖,具有显著的抗肿瘤活性,对癌细胞有抑制力;有学者报道,多糖的抗肿瘤作用一是表现为对肿瘤发生的预防,二是对已产生的肿瘤细胞的杀伤作用。因此,多糖在预防、治疗肿瘤方面有显著、突出的作

2、用,具有用量少、抗癌作用强、毒副作用小、对正常细胞没有影响的特点。有些真菌多糖还能杀死艾滋病病毒,能促使防治艾滋病病毒的主要免疫细胞CD4繁殖生长。多糖由于具备比从动物血液中提取的免疫球蛋白更大的实用性而日益受到人们的重视。有专家预言,二十一世纪蛋白质的时代要让位于多糖时代,这种预言是否正确暂且不论,但至少说明多糖在人类保健医学中的重要性已被广泛认同。野生或栽培的真菌子实体存在野生资源枯竭、栽培生产季节性强,培养周期长、重金属农残和杂菌等问题。而以生物技术生产真菌菌丝体制备多糖有着菌种纯正、大规模连续生产、可GMP控制质量、劳动生产率高等优势。目前我

3、国研发尚处于起步阶段,所以利用各方技术资源实施本项目是十分及时和非常必要的。真菌多糖的研究以日本处于领先地位,我国起步较晚,从二十世纪八十年代开始研究。据有关报道,目前,国内外已从高等担子菌中筛选到200余种有生物活性的多糖物质,我国发现有价值的真菌多糖有28种,其中化学结构比较清楚的有15种。现代医学药理研究已表明,真菌多糖主要具有增强免疫功能、抗肿瘤作用、抗衰老、促进蛋白质与核酸的合成、抵抗放射性破坏而增加白细胞含量、抗炎症、抗溃疡作用、降血糖作用、降血脂抗血栓作用、保肝作用、抗凝血作用、增强骨髓造血功能、调节中枢神经系统等十二种生理功能。三.真

4、菌多糖(猪苓多糖)功能试验采用环磷酰胺经KM小鼠腹腔注射,间隔7天注射一次,共三次。抑制其免疫功能,制造免疫抑制动物模型。然后对动物模型胃饲四种不同剂量的猪苓多糖,每天一次,连续15天以后,取KM小鼠的血清及脾脏淋巴细胞,进行以下试验。实验分组:共分6组,每组3只小鼠,每只小鼠体重20克。(1)生理盐水组(2)环磷酰胺组(3)猪苓多糖单剂组(4)猪苓多糖方剂高剂量组(5)猪苓多糖方剂中剂量组(6)猪苓多糖方剂低剂量组单剂、方剂配方及用量(1)每种单剂用量为100ug/鼠(2)猪苓多糖方剂高剂量为400ug/鼠、中剂量为100ug/鼠、低剂量为10ug

5、/鼠指标测定:(1)小鼠淋巴细胞增殖反应(ConA、LPS)(2)小鼠淋巴细胞杀伤功能检测(靶细胞:YAC-1、P-815、Lewis、HAC)(3)小鼠淋巴细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD56检测(4)小鼠血清免疫球蛋白IgG测定小鼠淋巴细胞增殖转化试验以ConA、LPS分别作为非特异性淋巴细胞刺激原,以3H-TdR掺入的微量细胞培养技术,观察动物模型胃饲菌丝体后,小鼠脾淋巴细胞增殖功能的变化情况。实验结果:CPMSICPMSIControlConAControlConA生理盐水组120±6749676±2459129±354287±947

6、环磷酰胺组1620±60828992±72271.01648±2382271±9531.0猪苓多糖组792±39260411±27892.2482±6214330±2572.1猪苓多糖方剂高剂量组2425±110632485±105451.1878±3834732±25082.1猪苓多糖中剂量方剂组2279±89342763±36991.33200±10655089±6291.0猪苓多糖方剂低剂量组1112±61279556±92302.91049±2033126±9131.1结论:低剂量猪苓多糖与单剂猪苓多糖对T细胞有明显的刺激作用,而单剂量组与高

7、剂量组对B细胞增殖有明显的刺激作用。小鼠NK、LAK对肿瘤细胞杀伤试验以YAC-1、P815、HAC、Lewis肺癌等建株的肿瘤细胞作为靶细胞,采用LDH方法,观察动物模型胃饲猪苓多糖后,小鼠NK、LAK对上述肿瘤靶细胞杀伤功能的变化情况。YAC-1P-815LewisHAC诱导前诱导后诱导前诱导后诱导前诱导后诱导前诱导后生理盐水组32.0432.8613.0626.5327.5032.8628.3330.46环磷酰胺组22.0827.2510.6319.9421.7426.1218.3521.05猪苓多糖组23.8533.23*19.00***13

8、.7619.04#33.01*17.68#23.26猪苓多糖方剂高剂量组35.61***33.57*21.7

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