《aqman探针原理》PPT课件

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1、是RNA探针。TaqMan荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5’末端,而淬灭剂则在3’末端。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。常用的荧光基团是FAM,TET,VIC,HEX。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有

2、望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台。相当于60元/mlT公司mix,扩PPARa定量纳米taq配制的mix,扩PPARa定量32个循环95℃5min;95℃5s,58℃10s,72℃10s;72℃25s;25℃1s。(可以3min,但为了结果稳定性,最好5min。)

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