西瓜抗炭疽病基因的分子标记研究

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1、密级浙江师范大学硕士学位论文题目：酉巫拉塞疸痘基国的佥壬握记殛究作者廑宝宝指导教师菹塾．．申请学位级别亟±专业垫堑堂(垫垫盆i童堡直盐2论文提交时间20131Q41Q3论文答辩时间2013．05．16学位授予时间论文评闲人IIIIIIIIlUlUlIIUY2413733DissertationforMasterDegreeofZhejiangNormalUniversityIdentificationofmolecularmarkerslinkedtoanthracnoseresistancegeneinwater

2、melonCandidate：NinganTangSupervisored：Prof．MinFanSpecialty：BotanyStudyField：PlantMolecularbiologyCollegeofChemistryandLifeScience，ZhejiangNormalUniversity,321000，Jinhua,China2013．04．03西瓜抗炭疽病基因的分子标记研究摘要西瓜[Citrulluslanatus(Thunb．)Matsum&Nadai]是一种世界性的园艺作物，在农业生产中占

3、有重要地位。随着西瓜栽培面积尤其是设施栽培面积的迅速增加，西瓜的病危害加剧。西瓜炭疽病是由瓜类炭疽病菌[Colletotrichumlagenerium(Pass．)E11．etHalst】引起的真菌性病害，在许多国家都有发生，该病害已成为影响西瓜产量和质的主要因素之一。防治该病害最有效的方法是培育抗病新品种。分子标记辅助选择育种可以加速新品种的选育。因此，利用分子标记技术筛选到与抗性基因紧密连锁的分子标记对育种有重要意义。目前，西瓜炭疽病的分子标记研究方面报道很少，本实验以抗病母本P1189225和感病父本Bla

4、ckDiamond及其构建的Fl、F2代群体为研究材料，通过对亲本、F1、F3代243个株系进行西瓜炭疽病抗性苗期接种鉴定，对抗性进行了遗传性分析；采用AFLP和SSR两种分子标记相结合对西瓜抗炭疽病基因进行分析，获得与抗病基因紧密连锁的分子标记，为西瓜炭疽病分子标记辅助选择育种提供了良好基础。本论文的研究内容及结果如下：1、本研究选取抗西瓜炭疽病的PI189225和感西瓜炭疽病的BlackDiamand为亲本材料，及其有性杂交的F2分离世代为试验材料。通过对F3代群体苗期接菌鉴定得到PIl89225×BlackD

5、iamond的F2代抗感分离情况，F2分离群体中抗病与感病的分离符合3：1的分离比率，初步表明西瓜炭疽病抗性基因为显性单基因控制。2、以改良的CTAB法提取高质量的西瓜基因组DNA，根据试验条件进行AFLP技术体系优化，通过优化模板量、酶切、连接、预扩增选等关键试验步骤，建立适合西瓜基因组AFLP分析的技术体系：500ng的西瓜基因组DNA，用IOUEcoRI和5UMse137℃双酶切4h：连接反应于16℃下连接4h；预扩增产物最佳稀释10倍。摘要3、利用AFLP和SSR技术寻找与西瓜抗炭疽病基因相关的分子标记，3

6、2条EcoRI引物和32条MseI引物共1024对AFLP引物组合对P1189225、BlackDiamond亲本进行筛选，获得了多态性好的引物组合43对；从279对SSR引物中获得7对多态性好的引物。利用这些引物组合对243株F2群体进行分析，获得了3个与西瓜炭疽病抗性基因连锁的AFLP标记E4／M19、El／M8、E29／M5，连锁距离分别为34．8cM、23．4cM、6．9cM。关键词：西瓜：西瓜炭疽病；分子标记：连锁分析：抗病基因IlIDENTIFICATIONOFMOLECULARMARKERSLINKE

7、DTOANTHRACNOSERESISTANCEGENEINⅥ7：ATERMELONABSTRACTWatermelonisaworldhorticulturalcrops，playsanimportantroleinagriculturalproduction．Withthewatermeloncultivationareaextendscontinuouslyanddiversificationofplantingmode，itcausedmanyillnessinwatermelon．Thewatermelo

8、nanthracnosecausedbyColleton’ichumorbicularethroughouttheworld，itmadegreatloseinwatermelonproduceintheworld．Itseverelylimitedthewatermelonyeildproductionandquality．Developingdiseas