《遗传毒性试验》PPT课件

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1、遗传毒性试验主要内容遗传毒性试验开展的原因遗传毒性试验涉及的医疗器械类样品遗传毒试验内容试验中注意事项扩项的试验仪器设备和试剂试验原始记录1.遗传毒性试验GBT16886.1-2001持久表面粘膜接触类持久损伤表面接触类持久血路接触类长期组织/骨/牙接触长期循环血液接触长期植入类医疗器械2.遗传毒性试验涉及的医疗器械类样品人工食道、接触眼镜、宫内节育器创伤、愈合和保护用敷料（烫伤用敷料、硅橡胶纱布）3.遗传毒性试验内容体外遗传毒性哺乳动物细胞畸变哺乳动物细胞基因突变哺乳动物细胞染色体畸变细菌基因突变Ames试验

2、遗传毒性-食品检测Ames试验和小鼠精子细胞染色体畸变试验体外与体内原核与真核常染色体与性染色体Ames试验试验原理试验流程结论判断Ames试验原理无组氨酸自发回复菌落空白对照无组氨酸突变菌落阳性............................…….…..….........…..……..…..…..…….…….…...……....……….……...……...….….…...…...….........…......................................…...........

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6、.....................................鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型（his－）菌株，在含微量组氨酸的培养基中，除极少数自发回复突变的细胞外，一般只能分裂几次，形成微菌落。受诱变剂作用后，大量细菌发生回复突变，自行合成组氨酸，发育成2倍以上阴性对照的菌落数。Ames试验流程试剂和琼脂的配置菌株鉴定平板深入试验结果观察和记录溶液和琼脂的配置0.5mmol/L组氨酸-0.5mmol/L生物素溶液顶层琼脂培养基磷酸盐缓冲液20%葡萄糖溶液底层培养基营养肉汤培养基S9混合物阳性物：

7、敌克松（TA97、TA98和TA102），1.0mg/ml，用DMSO配制；叠氮钠（TA100）,1.0mg/ml。活化组用2-蒽基芴（TA97,TA98,TA100），0.1mg/ml;1,8-二羟基蒽醌（TA102）0.6mg/ml.菌株鉴定菌株购买，投入使用前准备冻存菌株时对诱变剂丧失敏感时自发图变数不在正常范围时鉴定内容组氨酸缺陷型鉴定脂多糖屏障缺失鉴定R因子鉴定四环素鉴定紫外线照射修复鉴定自发回复突变鉴定组氨酸缺陷性鉴定TA97TA98TA100TA102TA97TA98TA100TA102无组氨酸有

8、组氨酸脂多糖屏障缺陷鉴定TA97TA98TA100TA102结晶紫染色沾有结晶紫的滤纸片R因子鉴定TA97TA98TA100TA102青霉素沾有青霉素滤纸片四环素鉴定TA98TA102四环素沾有四环素滤纸片uvrB突变鉴定TA97TA98TA100TA102紫外线照射8s33cm自发回复突变鉴定底层培养基顶层培养基+菌液每个菌株做两个平行皿菌株自发回复图变数TA9790~180TA98