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1、第二部分各章节习题及答案蛋白质和氨基酸的一级结构1、氨基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母和单字母缩写形式列出其侧链为如下要求的氨基酸:(a)含有一个羟基。(b)含有一个氨基。(c)含有一个具有芳香族性质的基团。(d)含有分支的脂肪族烃链。(e)含有硫。(f)含有一个在pH7-10范围内可作为亲核体的基团或原子,指出该亲核基团或原子。答:(a)Ser(S),Thr(T),Tyr(Y)(b)Asn(N),Gln(Q),Arg(R),Lys(K)(c)Phe(F),Trp(W),T
2、yr(Y),(d)Ile(I),Leu(L),Val(V)(e)Cys(C),Met(M)(f)可以作为亲核试剂的侧链基团或原子有位于Ser(S),Thr(T)和Tyr(Y)中的-OH;位于Cys(C)和Met(M)中的硫原子,位于Asp(D)和Glu(E)中的-COO-;以及位于His(H)和Lys(k)中的氮原子。2、一种氨基酸的可解离基团可以带电或中性状态存在,这取决于它的pK值和溶液的pH。(a)组氨酸有3种可解离基团,写出相应于每个pK值的3种解离状态的平衡方程式。每种解离状态下的组氨酸分子
3、的净电荷是多少?(b)在pH1、4、8和12时,组氨酸的净电荷分别是多少?将每一pH下的组氨酸置于电场中,它们将向阴极还是阳极迁移? 答:(a)、(b)见图3、某种溶液中含有三种三肽:Tyr-Arg-Ser,Glu-Met-Phe和Asp-Pro-Lys,α-COOH基团的pKa为3.8;α-NH3基团的pKa为8.5。在哪种pH(2.0,6.0或13.0)下,通过电泳分离这三种多肽的效果最好?答:pH=6.0比pH=2.0或pH=13.0时电泳能提供更好的分辨率。因为在pH=6.0的条件下每种肽都带
4、有不同的净电荷(+1,-1,和0),而在pH=2.0的条件下净电荷分别为+2,+1和+2,在pH=13.0的条件下净电荷分别为-2,-2和-2。4、利用阳离子交换层析分离下列每一对氨基酸,哪一种氨基酸首先被pH7缓冲液从离子交换柱上洗脱出来。(a)Asp和Lys(b)Arg和Met(c)Glu和Val(d)Gly和Leu(e)Ser和Ala答:(a)Asp(b)Met(c)Glu(d)Gly(e)Ser5、氨基酸的定量分析表明牛血清白蛋白含有0.58%的色氨酸(色氨酸的分子量为204)。(a)试计算牛
5、血清白蛋白的最小分子量(假设每个蛋白分子只含有一个色氨酸残基)。(b)凝胶过滤测得的牛血清白蛋白的分子量为70,000,试问血清白蛋白分子含有几个色氨酸残基?答:(a)32,100g/mol(b)26、胃液(pH=1.5)的胃蛋白酶的等电点约为1,远比其它蛋白质低。试问等电点如此低的胃蛋白酶必须存在有大量的什么样的官能团?什么样的氨基酸才能提供这样的基团? 答:-COO-;Asp,Glu7、已知某蛋白是由一定数量的链内二硫键连接的两个多肽链组成的。1.00g该蛋白样品可以与25.0mg还原型谷胱甘肽(
6、GSH,MW=307)反应。(a)该蛋白的最小分子量是多少?(b)如果该蛋白的真实分子量为98240,那么每分子中含有几个二硫键?(c)多少mg的巯基乙醇(MW=78.0)可以与起始的1.00g该蛋白完全反应? 答:(a)MW=24560;(b)4个二硫键;(c)6.35mg8、一个含有13个氨基酸残基的十三肽的氨基酸组成为:Ala,Arg,2Asp,2Glu,3Gly,Leu,3Val。部分酸水解后得到以下肽段,其序列由Edman降解确定,试推断原始寡肽的序列。(a)Asp-Glu-Val-Gly
7、-Gly-Glu-Ala(b)Val-Asp-Val-Asp-Glu(c)Val-Asp-Val(d)Glu-Ala-Leu-Gly-Arg(e)Val-Gly-Gly-Glu-Ala-Leu(f)Leu-Gly–Arg答:该肽链的序列可以通过将肽片段的相同序列重叠排列起来获得整个序列。见图9、下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:CNBr异硫氰酸苯酯丹黄酰氯脲6mol/LHClβ-巯基乙醇水合茚三酮过甲酸胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶,其中哪一个最适合完成以下各项任务?(a)测定小肽的氨基酸序列。(b)鉴定肽
8、的氨基末端残基。(c)不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂?(d)在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。(e)在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。(f)在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。 答:(a)异硫氰酸苯酯。(b)丹黄酰氯。(c)脲;β-巯基乙醇还原二硫键。(d)胰凝乳蛋白酶。(e)CNBr。(f)胰蛋白酶10、由下列信息求八肽的序列。(a)酸水解得Ala,Arg,Leu,Met,Phe,Thr,2Val(b)Sanger试剂处理得DNP-