甲状腺乳头状癌Survivin、p53表达与临床病理特征

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1、甲状腺乳头状癌Survivin、p53表达与临床病理特征【摘要】目的探讨新的凋亡抑制基因survivin和抑癌基因p53在甲状腺乳头状癌组织中的表达与甲状腺乳头状癌发生发展、临床病理特征之间的关系。方法应用免疫组织化学(SP法)，检测survivin、p53在102例甲状腺乳头状癌组织及10例结节性甲状腺肿组织中的表达。结果102例甲状腺乳头状癌组织中survivin、突变型p53（mt-p53）基因的阳性表达率分别为66.7%和81.4％。与良性病变组survivin、p53的阳性表达率30％、O％

2、相比较二者差异有显著的统计学意义(P<0.05)。甲状腺乳头状癌组织中突变型p53及survivin阳性表达率在不同性别、不同年龄、肿瘤大小，WHO大体分类及组织学分级间差异无显著性(P>0.05)。伴有淋巴结转移的甲状腺乳头癌组织中survivin的阳性表达率为79.5％，不伴有淋巴结转移者，survivin的阳性率为57.1%，二者差别有显著性(P<0.05)。突变型p53在甲状腺乳头状癌组织中表达的阳性率与淋巴结转移无关(P>0.05)。结论Survivin与mt-p53

3、在甲状腺乳头状癌组织中表达上调。Survivin表达与淋巴结转移有关,突变型p53表达与淋巴结转移无关。【关键词】甲状腺乳头状癌survivinp53基因免疫组织化学6遗传学研究表明甲状腺癌是多基因相关肿瘤，基因水平的变化可能在甲状腺癌的发生和发展过程中起到一个关键的作用[1]，survivin是凋亡抑制蛋白(IAP)家族的成员，survivin可对抗G2／M期诱导的凋亡，在癌组织中过度表达克服凋亡检测点，通过有丝分裂促进转化细胞的异常增殖[2]。P53为抑癌基因,survivin及mt-p53在大部

4、分肿瘤组织中过表达与肿瘤细胞死亡缺陷关联密切。本实验旨在采用免疫组织化学方法检测survivin、p53基因在甲状腺乳头状癌组织中的表达，探讨其与甲状腺乳头状癌临床病特征的关系。1资料与方法1.1标本选择选取广东医学院附属医院和宁夏医学院附属第二医院2001年1月一2003年12月临床和病理资料完整的102例甲状腺乳头状癌根治术组织标本，患者术前均未经过任何抗肿瘤治疗。其中男性24例，女性78例，最大年龄73岁，最小年龄12岁，中位年龄42岁。根据癌的浸润范围，组织结构和细胞形态等特点，按WHO分类标

5、准分类，其中微小癌15例，滤泡乳头型21例，高细胞型14例，嗜酸细胞型5例，弥漫硬化型2l例，包裹型26例。有淋巴结转移39例，无淋巴结转移63例。另选取结节性甲状腺肿标本10例作为对照组，其中男4例，女6例，中位年龄44岁。1.2免疫组织化学染色小鼠抗人p53(D01)和人survivin(FL-142)单抗及S-P试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。免疫组化采用S-P方法，操作步骤如下：①石蜡切片脱蜡至水；②3％H202室温孵育5～10min；③微波抗原修复；④正常山羊血清封闭，室温15mi

6、n，滴加p53和surivin-抗原工作液，冰箱内40C过夜；⑤PBS冲洗，滴加第二代生物素，标记二抗工作液，室温20min；⑥6PBS冲洗，滴加第二代辣根酶标记链霉卵白索工作液，室温20min；⑦PBS冲洗，DAB显色，自来水冲洗，苏木素复染，封片。已知的乳腺癌切片为阳性对照，PBS代替一抗作为空白对照。1.3结果判定采用双盲法，观察切片至少5个以上具有代表性高倍视野，不少于1000个细胞，对免疫结果进行评估。结节性甲状腺肿和甲状腺乳头状癌中p53和survivin的表达情况，survi诚n阳性表达

7、定位于细胞质，p53阳性表达则定位于细胞核和细胞质，均呈棕黄色。根据常规，p53和survivin阳性细胞在同类细胞中所占比例分4个等级。阳性细胞<10％为“一”，10％一25％“+”，26％～50％为“++”，>51％为“+++”。1.4统计学处理根据实验资料的性质，对所得资料进行χ2检验，P<0.05认为差别有统计学意义。2结果2.1Survivin、mt-p53在甲状腺乳头状癌组织中的表达情况Survivin阳性表达定位于细胞质，p53阳性表达定位于细胞核和细胞质，均呈棕黄色。

8、102例甲状腺状癌组织中，mt-p53阳性表达83例，阳性率为81.4％，而对照组10例全结节性甲状腺肿组织中无mt-p53表达，差别有显著性(x2=31．4，P<0．01)。102例甲状腺乳头状癌组织中survivin阳性表达为68例，阳性率为66.7％，而10例对照组中survivin阳性表达3例，阳性率为30％，差别有显著性(χ62=5.3，P<0.05)。mt-p53及survivin的基因在甲状腺乳头癌组织中表达明显上调。2.2mt