(预防医学)卫生微生物学-第四章方法卫检

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1、1第四章卫生微生物研究和检测的方法2卫生微生物检测的特点及基本原则卫生指示微生物卫生微生物研究和检测的方法卫生微生物研究和检测方法的前景3第一节卫生微生物检测的特点及基本原则41.卫生微生物检验与医学微生物检验的区别与特点?2.样品的采集原则?3.影响采样代表性的因素有哪些?4.怎样使采样具有针对性?5.样品采集后为什么要尽快送检?6.怎样保护样品中的待检微生物?7.样品中抑菌物质去除方法有哪些?8.样品的处理策略(目的)与方法9.怎样浓缩样品中的微生物?10.环境中的微生物数量低,怎样提高检出率?5一、卫生微生物检测的特点1

2、.检测的对象多病原微生物+非致病和条件致病微生物特别是能反映环境、食品、健康相关产品等样品卫生质量的卫生指示微生物。62.检测的范围广,标本的来源不仅局限于人体,也来源于空气、水、食品等环境。73.检测的方法更敏感,以检测环境标本中数量很低的致病微生物。问题:你知道哪些方法?你认为什么方法更敏感?84.定量测定和分型检测,以探明感染性疾病的传染源、传播途径、流行情况等。9二、卫生微生物检测的基本原则10(一)采集、保存、运送、检测的总原则生物安全代表性/针对性防污染防杀菌细标记111、生物安全防人员感染:个人防护(?)防标本和

3、环境的污染:无菌操作、恰当处理污染废弃物裴晓方xxpei@sina.com122、注意采样的代表性影响采样代表性的因素包括:采样量采样部位采样时间采样的随机性和均匀性以及按批号抽样133、注意采样的针对性样品种类恰当时间采样量144、防污染避免采样时外界微生物对样品的新污染:所有采样用具、容器需严格灭菌,并以无菌操作采样。155、防杀菌避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新的抑菌物质:如容器是否有消毒剂的残留,或使用刚烧灼未冷却的采样工具。裴晓方xxpei@sina.com166、注意对样品的详细标记:样品名称编号采样时间采样者

4、检测项目2021/8/1417(二)样品的运送原则1、尽快送检采集的样品,应在规定的时间内(一般不超过3~4小时)送到实验室,尽快送检。一方面可减少待测微生物的死亡。另一方面可防止微生物的繁殖对计数结果的影响2021/8/14182、保护待检微生物温度调节加入保护剂去除其他不利于待测微生物生存的因素2021/8/1419pH蛋白质抑制剂抑制非目的微生物渗透压气体2021/8/14203、遵循完善的样品交接制度送往实验室的样品,必须附有样品送检单,实验室收到样品应按送检单逐项核对,检查样品是否符合检验要求,确证无误方可签收待检。

5、2021/8/1421(三)实验室检验原则2021/8/1422相应的硬件条件和设备具有合格的检验人员标准/公认的检验方法实验室质量控制1、环境实验室环境不应影响检验结果的准确性工作区与办公区分开工作面积应满足检验工作的需要温度、湿度、照度、噪声和洁净度等应符合工作要求整体布局应采用单方向工作流程,避免交叉污染一般样品检验:洁净区(超净工作台或洁净实验室)病原微生物分离鉴定:BSL-22021/8/14242、应有检测不同病原菌的相应的条件和设备微生物按其是否致病、致病力强弱、危害人体的严重性、传染性的大小、当地人群的免疫水平

6、、有无免疫制剂和特效治疗药物等可分成不同的危害等级。在不同生物安全级别实验室进行2021/8/1425实验室生物安全与管理很重视?2021/8/1426病毒灭活不彻底引发实验室感染2004北京、安徽发生非典疫情原因调查结果。调查组认为,本起疫情来自中国疾控制中心实验室内感染,而引起实验室感染的环节,是腹泻病毒室工作人员进行实验时,对SARS病毒灭活不彻底。2021/8/1427实验室生物安全与管理生物危害非工作人员严禁入内2021/8/1428实验室生物危害在微生物和生物医学实验室研究过程中生物因子(病原微生物)对人、环境、生

7、态和社会造成的危害和污染。2021/8/1429实验室生物安全为了避免微生物和医学实验室中在进行各种有危害或有潜在危害的生物因子活动过程中,可能对人、环境和社会造成的危害或潜在危害,而采取的防护措施(硬件)和管理措施(软件),达到对人、环境和社会的安全防护目的2021/8/1430微生物实验室生物安全主要考虑实验室生物安全防护,即实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时,通过在实验室设计建造、使用个体防护设施、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施,确保实验室工作人员不受实验对象的感染,确保周围

8、环境不受实验对象的污染。2021/8/1431实验室生物安全级别2021/8/1432感染性微生物的危险度等级分类危害等级I(低个体危害,低群体危害)不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。危害等级Ⅱ(中等个体危害,有限群体危害)能引起人或动物发病,

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