发育中小鼠胃内组胺免疫反应细胞的形态学研究

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1、山西医科大学硕士学位论文发育中小鼠胃内组胺免疫反应细胞的形态学研究姓名：乔爱秀申请学位级别：硕士专业：组织胚胎学指导教师：王彤2003.6.13山西医科大掌硕士学位论文2口刃发育中小鼠胃内组胺免疫反应细胞的形态学研究摘要目的：1．选择光镜下显示组胺阳性细胞免疫组织化学技术所适用的固定液及组胺抗体的最佳稀释度；2．观察小鼠生后1天至45天胃内组胺阳性细胞的发生、分布及形态特征；3．观察组胺阳性细胞与G细胞、D细胞、及壁细胞之间的位置关系。方法：在4％中性甲醛液、Bouin’s液、4％多聚甲醛液和MAw液中选择组胺免疫组

2、化技术所适用的固定液，选择组胺抗体的最佳稀释度；应用免疫组化sP法观察小鼠生后1天至45天胃内组胺阳性细胞的发生、分布和形态；观察组胺阳性细胞与G细胞、D细胞和壁细胞之间的位置关系。结果：1．经MAw液、4％中性甲醛液固定，不能清楚地显示组胺阳性细胞；经Bouin’s液固定，组胺阳性物质虽局限在细胞胞质内，但呈溶解状态：经4％多聚甲醛液固定，组胺阳性细胞轮廓清晰，免疫反应阳性颗粒集中分布在胞质内。在组胺抗体10种稀释度中，以1：400效果最佳。2．小鼠出生后第5天，胃体部粘膜上皮中方可见组胺阳性细胞。出生后第15天，

3、胃体部粘膜中组胺阳性细胞数量增多，出生后第30天、45天，胃体部粘膜迸一步增厚，胃底腺充分发育，组胺阳性细胞数量明山西医科大掌硕士掌位论文2口n；显增多，主要密集分布于胃体部粘膜的下1／3处，形成带状。粘膜中部可见散在的组胺阳性细胞，镶嵌在壁细胞之间。胃体和胃窦部的粘膜下层中也可见少量组胺弱阳性细胞。镜下观察，胃粘膜上皮内的组胺阳性细胞多为闭合型，胞体较小，形态不规则，有些细胞的突起伸到其它细胞之间，深染的免疫反应阳性颗粒不仅见于胞质内，也见于伸出的细长突起中。常可见组胺阳性细胞聚集、环抱壁细胞，同时，细胞的侧面有时

4、可见免疫反应阳性物质逸出。3．G细胞仅见于胃窦部粘膜内，胃体部粘膜中可见散布的D细胞，但数量远少于组胺阳性细胞，两种细胞都有突起伸到与之相邻的细胞之间。结论：1．比较上述4种固定液的固定效果，4％多聚甲醛液为显示组胺阳性细胞较好的固定液。而组胺抗体的稀释度以1：400为宜。2．小鼠生后第5天胃体部粘膜中出现组胺阳性细胞，其出现的时间较G细胞、D细胞、EC细胞晚；而生后随胃粘膜和胃底腺的发育，组胺阳性细胞的数量呈显著性增加。根据分布位置判断，位于胃粘膜下1／3处的组胺阳性细胞可能为ECL细胞。3．观察ECL细胞和G细胞

5、、D细胞、壁细胞的位置关系提示，G细胞分泌的胃泌素，可能以内分泌的方式作用于EcL细胞，ECL细胞释放的组胺，又可能通过内分泌或旁分泌的方式作用于壁细胞。D细胞则可能通过旁分泌方式调节以上细胞的分泌活动，共同参与对胃酸分泌的调节。关键词：小鼠胃；发育；免疫组织化学；组胺阳性细胞；G细胞；D细胞；壁细胞山西医科大学硕士掌位论文2口口3TheMorphologicaIStudyontheHistaminePositiveCellsintheStomachofDevelopingMouseABSTRACTobjective

6、：lTbselectabetterfixativeforimmunohistochemicallydetectinghistaminepos“ivecellsunderl培htmicroscope2．Tostudytheontogeny，distributjon，morpholOgyandquaIltitatiVechangeofbistaminepos“ivecellsinthemousestomachfromday1today45aRerbirth，aswellasthea11atomicalrelatioIls

7、h

8、phistam．mepositivecellswithGcells，Dcells，a11dp缸etalcellsMethods：thesa】呻leswere做edwith4％form“dehyde，Bouin’snuid，4％paraformaldehydeandMAWfIuidrespectivelyinordertoselectasuitabIefixativeforthehistamineimmunochemicaltechniquesandtodefinethemostappropriatedilutio

9、nofhistamineantibodyThesectionsofmousestomach疔omday1today45afterbirthwerestamedwithimmunohistochemicalSPme山odtoshowtheontogeny，distributionandmofphologicalcharacteristicsofh