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1、益肾健脾养血通利方对多囊卵巢综合征大鼠模型胰岛素样生长因子-1mRNA表达的影响【摘要】目的观察益肾健脾养血通利方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型胰岛素样生长因子-1(IGF-1)mRNA表达的影响,从而在分子水平初步探讨该方治疗PCOS的可能机制。方法SD雌性大鼠72只,随机分为正常对照组、模型组、克罗米芬组及中药小、中、大剂量组,除正常对照组外,其余各组皮下埋植左旋炔诺孕酮硅胶棒,建立PCOS大鼠模型,应用原位杂交法观察IGF-1mRNA在大鼠多囊卵巢中的表达。结果模型组IGF-1mRNA表达明显高于对照组,图像半定量分析显示中药治疗组均能减少IGF
2、-1mRNA的表达。结论益肾健脾养血通利方具有降低大鼠多囊卵巢中IGF-1mRNA的表达,改善胰岛素抵抗状况的作用。【关键词】多囊卵巢综合征;益肾健脾养血通利方;胰岛素样生长因子-1;动物模型Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofYishenJianpiYangxueTongliFang(YSJP)onIGF-1mRNAexpressionintheovaryofPCOSrat,andstudyitsmechanismonthemolecularlevel.MethodsSeventytwofemaleSDra
3、tswererandomlydividedintonormalcontrolgroup,modelgroup,clomifenegroupandlow-,mid-,high-doseChinesemedicinegroup.Theanimalmodel8establishedbycapsulaelevonorgestrelisilasticuswasusedtoobservetheIGF-1mRNAexpressioninovarybyhybridizationinsitu.ResultsIGF-1mRNAexpressionofPCOSmodelgroup
4、washigherthanthenormalcontrolgroupobviously.Thesemi-quantitativeimageanalysisshowedthatTCMtreatmentcoulddecreaseIGF-1mRNAexpression.ConclusionYishenJianpiYangxueTongliFangcoulddecreasetheIGF-1mRNAexpressioninovaryandimprovetheinsulinresistanceofPCOSrats.Keywords:polycysticovarysynd
5、rome;YishenJianpiYangxueTongliFang;IGF-1;animalmodel 目前,多数学者认为胰岛素抵抗和高胰岛素血症与多囊卵巢综合征(PCOS)的发病密切相关,是PCOS主要特征之一。大量研究表明,胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在PCOS胰岛素抵抗、高胰岛素血症及高雄激素血症中起着重要作用。全国名老中医柴松岩根据多年临床经验认为,本病多因脾肾不足、痰湿阻遏而发病,其经验方益肾健脾养血通利方具有明显改善PCOS患者月经状况、促进排卵及妊娠的作用[1]。本研究应用原位杂交法观察IGF-1mRNA在大鼠多囊卵巢中的表达,从而在
6、原有基础上从分子水平探讨该方治疗PCOS时,对其病理生理过程的可能作用。8 1实验材料 1.1动物雌性SD大鼠,24日龄,中国科学院遗传与发育生物学研究所动物中心提供,许可证编号:SCXK(京)2002-0006。 1.2药物与试剂健脾益肾养血通利方浸膏,单味药均购自同仁堂药店,经鉴定为正品;中国中医科学院医学实验中心制剂室精制;临床人用量为120g原药材/d,批号041002。枸橼酸氯米芬胶囊,上海衡山药业有限公司生产,批号040501;注射用人绒毛膜促性腺激素(HCG),上海第一生化药业有限公司生产,批号030610;左旋炔诺孕酮硅胶棒,黑龙江省丹
7、东市鸭绿江制药厂生产,批号20010101;焦碳酸二乙酯(DEPC),Sigma公司产品。 2实验方法 2.1分组872只SD雌性大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、克罗米芬组(25mg/kg)及中药小(5g/kg)、中(10g/kg)、大(20g/kg)剂量组(分别相当于人用量的2.5、5、10倍),每组12只。 2.2造模及给药 参照文献[2]方法,常规饲养3d后,除正常对照组外,其余5组皮下埋植左旋炔诺孕酮硅胶棒(3mm,内含左旋甲基炔诺酮3.6mg),于27日龄时每只动物皮下注射HCG1.5U,每日2次,共9d,正常对照组每日注射等容积生理
8、盐水。克罗米芬组及中药各剂量组分别按照上述剂量灌胃给