玻璃化法保存异体动脉的实验研究

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1、中国人民解放军军医进修学院博士学位论文玻璃化法保存异体动脉的实验研究姓名：魏民申请学位级别：博士专业：骨外科指导教师：张伯勋;刘郑生2002.6.1博

2、：论文玻璃化法保存异体动脉的实验研究!塞塑矍中文摘要玻璃化法保存异体动脉的实验研究研究背景l临床上常用低温冷冻法保存异体动脉。其机理是细胞在低温状态下代谢降低，因而存活时间延长。但是，低温冷冻法操作较为复杂费时，而且所保存的动脉活性有限。新近出现的玻璃化法操作简便，由于在保存过程中没有冰晶形成，因而对细胞和组织所造成的损伤更小。现已应用玻璃化法成功地进行了多种细胞的保存，对组织的玻璃化研究也开始起步。但玻璃化法保

3、存异体动脉的研究在国内外文献中还未见报道。’目的筛选出合适的玻璃化法条件对异体动脉进行保存，并与低温冷冻法进行体外和体内比较，以探讨玻璃化法临床应用的可行性。方法现将实验方法分述如下：(1)运用正交设计和血管活性快速检测技术(TTC试验)，筛选出适合家兔股动脉玻璃化保存和低温冷冻保存的条件。(2)应用玻璃化法进行家兔股动脉保存，然后对动脉进行细胞培养，观察培养后细胞的存活情况，并与新鲜动脉和低温冷冻动脉进行比较，以了解玻璃化法保存动脉的细胞活性。(3)应用玻璃化法保存2周的家兔股动脉进行大体形态、显微形态和超微结构观察，以了解保存后动脉的组织形态结构的改变；应用

4、氯化钾和去甲肾上腺素行血管收缩试验，应用乙酰胆碱和硝普钠行血管舒张试验，以了解保存后动脉的舒缩功能；对动脉进行单轴纵向拉伸试验，登：譬!塞篓基燕鎏堡堡璧整垫璧整塞篓篓塞曼苎鲞萋以了辫傈痒嚣秘辣黝力学毽怒。遵过玻璃纯动辣与瑟鳞动默、艇瀑冷冻鹚默懿抟铃魄较，扶藤了辩玻璃豫涟绦存葫拣熬俊簸点。(4)成瓣玻璃捷潼{襞存2趱鹣客受毅瑟辣送行器蒋移旗，分裂予拳嚣2爨、1个嚣、2令嚣弱《个翼敬毒砉，黢察移褴菇镄躲谯形杰然鞠、斑缝黟成秘受痰摊琢等方瑟豹变纯，势与薪癸自转渤酞胬糕澈冷冻癸体秘躲避嚣波较，疆了瓣玻璃张凌藤箨梵舞搏穆穗枣芎瓣麴掰褥链。(S)玻璃纯法保襻1年的鹚躲避野侮

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9、巴细胞浸润等过程。但低温冷冻异体动脉的免疫排斥反应较玻璃化异体动脉明显。(5)玻璃化法保存1年的动脉在组织形态和力学性能方面与保存2周的动脉没有明显变化，而在舒缩功能方面有轻度降低。细菌培养阴性。将玻璃化法保存1年的动脉进行异体移植，并与保存2周的动脉进行比较，发现组织形态学方面的变化相似，4个月时通畅率达到83．33％，与保存2周的动脉相同。结论玻璃化法保存动脉操作程序简便，而且由于在降温和复温过程中没有冰晶形成，因而对动脉整体结构和活性影响小。玻璃化法所保存的动脉具有较好的细胞活性：较好地保持了动脉的组织形态结构、舒缩功能和力学性能；异体移植后虽存在免疫排斥

10、反应，但反应较小而且获得