EGFR、MT、CD44v6在乳腺癌中的表达及意义

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1、EGFR、MT、CD44v6在乳腺癌中的表达及意义作者:胡文庆 李小力闫曙光【关键词】乳腺癌摘要目的:探讨EGFR、MT、CD44v6与乳腺癌的关系。方法:采用免疫组织化学链霉亲和素―生物素过氧化物酶标记法,用EGFR、MT、CD44v6单克隆抗体对42例存档石蜡包埋乳腺癌标本进行EGFR、MT、CD44v6蛋白表达检测,并与同期20例乳腺纤维瘤作对比。结果:EGFR、MT、CD44v6的阳性表达率在乳腺癌、乳腺纤维瘤中分别为83.3%、76.2%、83.3%;30%、10%、0,三种指标在乳腺癌中的阳性表达率

2、均显著高于乳腺纤维瘤中的阳性表达(PEGFR<0.01、PMT<0.01、PCD44V6<0.01),EGFR的阳性表达在有、无淋巴结转移及临床分期Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期、Ⅳ期间有显著性差异(P淋巴<0.01、P分期<0.05),MT阳性表达在有、无淋巴结转移及临床分期Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期、Ⅳ期间有显著性差异(P淋巴<0.01、P分期<0.01),CD44v6的表达与乳腺癌的淋巴转移及临床分期无关。结论:EGFR、MT和CD44v6在乳腺癌中的表达异常是一个普遍事件,EGFR、M

3、T的超表达发生在乳腺癌发展中晚期,CD44v6蛋白出现在乳腺癌的早期。EGFR和MT有望成为乳腺癌的预后判断指标,CD44v6有可能成为乳腺癌的早期诊断指标。6  关键词乳腺癌;癌基因;EGFR;MT;CD44v6乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤。在我国,乳腺癌约占全身恶性肿瘤的7%~10%,是女性发病率最高的恶性肿瘤。其发病有逐年增多且有发病年龄年轻化的趋势。目前认为,乳腺癌的发生、发展中,包含癌基因突变激活和抗癌基因突变失活等多种分子事件。因此,癌基因蛋白、肿瘤相关蛋白联合表达与乳腺癌关系的研究非常必要。本文研究

4、EGFR、MT、CD44v6在乳腺癌中的联合表达,探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用和意义。1材料方法  1.1一般资料收集我院1999年~2004年经手术切除的乳腺癌及乳腺纤维腺瘤患者,诊断均经病理证实。术前未行放、化疗,其中乳腺癌42例,年龄28岁~78岁。乳腺纤维腺瘤20例,年龄21岁~59岁。  1.2主要试剂和方法从丹麦Dako公司购进EGFR、MT、CD44v66单克隆抗体,从武汉博士德公司购进SABC试剂盒、粘片剂APES和DAB显色试剂盒。PBS缓冲液pH=7.3±0.1,自行新鲜配制。采用免疫组

5、织化学链酶亲和素-生物素过氧化物酶标记法,空白对照中用PBS代替第一抗体,其他步骤相同。阳性对照为武汉博士德生物有限公司提供的阳性对照片。1.3结果判断标准EGFR、MT染色阳性细胞为胞浆或胞膜染有片状或颗粒状棕黄色。CD44v6染色阳性细胞为胞膜染有片状或颗粒状棕黄色。免疫组化阅片由两名病理专科医师独立进行。1.4统计学方法采用χ2检验和四格表确切概率法,以P<0.05为显著性检验水准。2结果EGFR、MT的免疫反应产物定位于细胞膜和细胞浆,其阳性染色为漫状棕黄色或颗粒样棕黄色(见图1,图2)。CD44

6、v6的免疫反应产物定位于细胞膜,其阳性染色为细胞膜棕黄色染色。EGFR、MT联合阳性表达在乳腺癌肿瘤直径大于和小于等于5cm,有和无淋巴结转移,临床分期Ⅲ期、Ⅳ期和Ⅰ期、Ⅱ期间均有统计学差异(P直径<0.05、P淋巴<0.01、P分期<0.01);EGFR和CD44V6联合阳性表达及MT和CD44V6均阳性表达在乳腺癌肿瘤直径大于和小于等于5cm,有和无淋巴结转移,临床分期Ⅲ期、Ⅳ期和Ⅰ期、Ⅱ期间无统计学差异。EGFR、MT和CD44V66联合阳性表达在乳腺癌有和无淋巴结转移,临床分期Ⅲ期、Ⅳ

7、期和Ⅰ期、Ⅱ期间中有显著性差异(P淋巴<0.05、P分期<0.01)。表1EGFR、MT、CD44v6在乳腺癌中的表达情况3讨论EGFR基因定位于第七号染色体短臂,EGFR蛋白即表皮生长因子受体,是一个由1186个氨基酸组成的单链跨膜糖蛋白,具有酪氨酸蛋白激酶活性。EGFR与恶性肿瘤关系密切。一方面EGFR与EGF族配体结合后,在细胞的恶性增殖中起重要作用,另一方面EGFR位点与某些癌基因具有同源性[1]。金属硫蛋白(MT)是一种富含半胱氨酸并能结合多种重金属的低分子特殊非酶蛋白质,成人MT水平极低

8、。MT在成人中的超表达被认为类似其他肿瘤胚胎基因产物,并可作为肿瘤标记物[2]。人类CD44基因位于第11号染色体短臂上,含有V区外显子的CD44转录子统称CD44v,CD44蛋白是分布极为广泛的细胞表面跨膜糖蛋白,属于细胞表面的粘连分子,主要参与细胞-细胞、细胞-基质之间的特异性粘连过程。目前,许多研究表明,CD44v6与肿瘤的侵袭和转移密切相关[3,4]。6本研究发现,在乳腺癌中E

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