BD破膜剂试剂手册中文

《BD破膜剂试剂手册中文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、破膜剂试剂手册BDCytofix/Cytoperm固定/渗透试剂盒手册（目录号554714）BDCytofix/CytopermPlus固定/渗透试剂盒（BDGolgiStop含有莫能菌素的蛋白质转运抑制剂）（目录号554715）BDCytofix/CytopermPlus固定/渗透试剂盒（含布雷菲德菌素A的BDGolgiPlug蛋白质转运抑制剂）（目录号555028）Ficoll是AmershamBiosciencesAB的注册商标。Hypaque是AmershamHealthAS的注册商标。BD流式细胞仪是1流激光产品。仅供研究使用。不用于

2、诊断或治疗程序。2016年Becton，Dickinson和公司。版权所有。本出版物的任何部分不得以电子，机械，磁性，光学，化学，手册或其他方式以任何形式或通过任何方式复制，传播，转录，存储在检索系统中或翻译成任何语言或计算机语言，未经BDBiosciences事先书面许可。购买不包括或携带任何权利转售或转让本产品作为独立产品或另一产品的组成部分。未经Becton，Dickinson和Company明确书面许可，严禁使用本产品以外的许可使用。2016BD，BD徽标和所有其他商标均为Becton，Dickinson和Company的产权。目录BD

3、Cytofix/Cytoperm固定/渗透试剂盒BDCytofix/CytopermPlus固定/渗透试剂盒（BDGolgiStop蛋白质转运抑制剂）BDCytofix/CytopermPlus固定/渗透试剂盒（BDGolgiPlug蛋白质运输抑制剂）警告和注意事项1.一般程序 A.刺激细胞1.使用BDGolgiStop的程序蛋白质转运抑制剂（含有莫能菌素）2。使用BDGolgiPlug蛋白质转运抑制剂的程序（含布雷菲德菌素A）B.方案：细胞表面抗原和细胞内细胞因子的多色染色1收集细胞2.阻止Fc受体3.细胞表面抗原染色4.固定和渗透细胞5.备

4、选固定和渗透方案6细胞内细胞因子染色C.流式细胞分析。D.染色控制1.阳性染色控制2.阴性染色控制a.同种型对照b.配体阻断控制。c.未标记的抗体阻断控制。解决方案样品数据备选方案全血活化和细胞内染色。预期结果解决方案参考文献BDBiosciences提供三个试剂盒，以简化细胞的固定和透化，用于细胞质内细胞因子的免疫荧光染色。BDCytofix/Cytoperm固定/渗透试剂盒提供固定/透化溶液和渗透/洗涤溶液。BDCytofix/CytopermPlusFixation/PermeabilizationKit（含有BDGolgiStop蛋白质

5、转运抑制剂）提供了这两种溶液加上含有莫能菌素的蛋白质转运抑制剂，用于处理新鲜移植或培养的细胞，以促进胞质内细胞因子的积累。BDCytofix/CytopermPlus固定/渗透试剂盒（含有BDGolgiPlug蛋白质转运抑制剂）提供了两种溶液，另外还有一种含有布非司定A的蛋白质转运抑制剂。这些试剂盒提供足够的两种染色≥200个细胞样品的溶液。BDCytofix/Cytoperm固定/渗透试剂盒（目录号554714）该试剂盒能够使细胞固定和透化，其是用荧光染料共轭荧光标记的抗细胞因子抗体染色细胞内细胞因子所必需的。该试剂盒提供两种试剂，固定/渗透

6、溶液和BDPerm/Wash缓冲液。细胞固定和透化后，用BDPerm/Wash缓冲液洗涤细胞并稀释抗细胞因子抗体进行染色。注意：用BDPerm/Wash缓冲液稀释抗细胞因子抗体很重要，而不是用标准染色缓冲液，以保持细胞内染色的细胞处于透化状态。试剂盒成分：固定/渗透溶液（125mL）BDPerm/Wash缓冲液，10X浓缩物含有胎牛血清（FBS）和皂角苷（使用前在蒸馏水中稀释1:10）（100mL）注1：虽然固定/渗透溶液和BDPerm/Wash缓冲液含有防止污染的成分，建议使用无菌移液器除去溶液，使用后立即关闭瓶子。注2：BDPerm/Was

7、h缓冲液作为包含FBS的10储备溶液。该产品的颜色可能因批次而异，并且可能含有可见的沉淀物。颜色变化和/或沉淀物不影响产品性能。BDCytofix/CytopermPlus固定/渗透试剂盒（BDGolgiStop蛋白质转运抑制剂）（目录号554715） 除了固定/渗透溶液和BDPerm/WashBDCytofix/Cytoperm中包含的缓冲液固定/渗透试剂盒，BDCytofix/CytopermPlus固定/渗透试剂盒提供含有莫能菌素的BDGolgiStop蛋白转运抑制剂。BDGolgiStop离体添加到体外或体内刺激的细胞阻断其细胞内转运过

8、程。这导致大多数细胞因子蛋白在高尔基复合体中的积累，从而增强细胞因子染色信号（见图2-4）。BDGolgiStop试剂，至少能处理1升细胞密度高达2×