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时间:2019-05-11
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1、植物细胞工程班级姓名学号用时:45分钟满分:100分一、学习目标:1.简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。2.列举植物细胞工程的实际应用。3.尝试进行植物组织培养。二.学习重点和难点1.教学重点(1)植物组织培养的原理和过程。(2)植物体细胞杂交的原理。(3)植物细胞工程应用的实例。2.教学难点植物组织培养的实验。三.基础知识梳理(一).植物组织培养技术1、原理步骤是:2、条件是思考:①生物体内细胞全能性的大小一样吗?②细胞分化的过程遗传物质有丢失吗?(二).植物体细胞杂交技术1.植物体细胞杂交的关键环节是和2.植物细胞去壁用的酶是3.诱导原生质体融合的方法思考:为什么番茄——
2、马铃薯超级杂种植株没有如科学家所想象的那样,地上长番茄,地下结马铃薯?(三).植物细胞工程应用的实例1.植物繁殖的新途径2.物新品种的培育四、重难点突破、例题解析考点一细胞的全能性分化的细胞具有全能性,可以从理论上分析细胞的来源——有丝分裂,形成的子细胞核应与受精卵的完全相同:含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体必需的全部基因,应该具有全能性。实际上在体内分化的细胞没有表达出全能性,原因是基因的选择性表达。但离体培养时,脱离母体的限制,在一定条件下就能表达。考点二植物组织培养中的脱分化及再分化植物组织中使用的外植体一般是高度分化了的细胞,在植物体中是不会再分裂繁殖
3、的,只是执行某种功能直至死亡。这些细胞在培养基上时会由原来的分化状态变成分生状态的细胞,分裂产生愈伤组织,这个过程称为脱分化过程。这种转变在细胞的形态结构和生理生化上都会产生一系列变化。组织培养的研究表明分化细胞的脱分化需要两个条件。即创伤和外源激素。当细胞脱分化形成愈伤组织后,经过一段时期的分裂,细胞群体变成不是一种细胞类型的均一群,又会产生分化,形成分化细胞或分生细胞团,由此再生成植物有两条途径:一是形成体细胞胚,通过体细胞胚形成再生植株;二是走器官发生的途径,分生组织在一定的诱导条件下重建芽的分生组织,分化出芽后再生根,成为完整的植株。考点三.植物体细胞杂交过程中筛选杂种细
4、胞细胞的原因番茄和马铃薯的原生质体融合后,将原生质体转移到适当的培养基上培养,使原生质体再生出细胞壁。这时,在细胞混合物中不仅有番茄——马铃薯杂种细胞,还有番茄细胞、马铃薯、番茄——番茄细胞、马铃薯——马铃薯细胞,而只有番茄——马铃薯杂种细胞才有同时具有双亲的遗传物质。例题:现有甲、乙两个烟草品种(2N=48),其基因型分别为aaBB和Aabb,这两对基因们于非同源染色体上,且在光照强度大于800勒克斯时都不能生长,这是由于它们中的一对隐性纯合基因(aa或bb)作用的结果。取甲、乙两品种的花粉分别培养成植株,将它们的叶肉细胞制成原生质体,并将两者相混,使之融合,诱导产生细胞团。然
5、后,放到大于800勒克斯光照下培养,结果有的细胞团不能分化,有的能分化发育成植株。请回答下列问题:(1)甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别是和。(2)将叶肉细胞制成原生质体时,使用去除细胞壁;(3)在细胞融合技术中,常用的促融剂是。(4)在大于800勒克斯光照下培养,有种细胞团不能分化;能分化的细胞团是由的原生质体融合来的(这里只考虑2个原生质体的相互融合)。由于该细胞团发育成的植株自交后代中,在大于800勒克斯光照下出现不能生长的植株的概率是。 五、巩固练习1、进行植物体细胞杂交,首先需要除去细胞壁。现提供以下材料和用具:白色洋葱鳞片叶、紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的盐酸、适宜浓度的
6、蔗糖液、纤维素酶、果胶酶、蒸馏水和镊子,显微镜、载玻片、盖玻片等。请你从中选取合适的材料配制成合理的细胞壁分解液,并设计出检验它除去细胞壁的方法和步骤,预测和解释实验的结果。 (1)实验步骤:①配制细胞壁分解液:选取 配制成细胞壁分解液。这样选取的理由是 。②检验细胞壁分解液除去细胞壁的方法:第一步: 。第二步: 。第三步: 。(2)实验结果的预测和解释:
7、 2、下图是植物细胞杂交过程示意图,请据图回答:(1)植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体。目前此步聚最常用的方法是酶解法,也就是在温和的条件下用 等分解植物的细胞壁。(2)②过程的发生,必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的物理方法是:利用.等(至少写出两种)促使原质体融合;化学方法是:用 等试剂作为诱导剂诱导融合。(3)③表示
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