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《细菌内毒素国家标准品原料的制备及其理化性质和生物学活性的分析_于婷》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、细菌内毒素国家标准品原料的制备及其理化性质和生物学活性的分析3于婷,蔡彤,张国来,高华,李波(中国药品生物制品检定所,北京100050)摘要:目的制备第7批细菌内毒素国家标准品的原料。方法常规方法培养和收获细菌,超声破碎菌液,热酚水法制备内毒素粗品,充分透析去酚后,浓缩,取上清,超速离心(4℃,105000×g,4h),最后冻干。采用该方法共制备得到3批内毒素原料候选品,对其进行理化分析和生物学活性测定后,确定其中一批作为内毒素国家标准品原料。同时与细菌内毒素国际标准品、中国细菌内毒素国家标准品(NS,Lot:
2、981)和日本细菌内毒素国家标准品进行一系列比较。结果3批原料候选品中,3号内毒素原料的生物学活性最好,杂质含量最低。结论3批内毒素原料的生物学活性以及理化性质基本一致,表明采用的提取方法稳定、重现性好。通过生物学活性和杂质含量的比较,结果表明,3号内毒素原料可以作为制备新一批细菌内毒素国家标准品的原料。关键词:内毒素;细菌内毒素国家标准品;热酚水法中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:1001-2494(2010)05-0388-04PreparationandPropertiesofBacterial
3、EndotoxinNationalStandardMaterial3YUTing,CAITong,ZHANGGuo2lai,GAOHua,LIBo(NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts,Beijing100050,China)thABSTRACT:OBJECTIVETopreparethe7bacterialendotoxinnationalstandardmaterial1METHODSEscherichiaco
4、liO11B4wasculturedandharvestedbyroutinemethod,bacterialliquidwasbrokenbysupersound,thencrudeendotoxinmaterialwasextractedbyhotphenol2water.Aftersufficientdialysistoremovealltracesofphenol,endotoxinwasconcentrated1Thesupernatantwaschosenandpurifiedbyultracent
5、rifgeat105000×gat4℃for4h1Finallythesedimentwasfreeze2dried1Threebatchesofendotoxinmaterialcandidatewerepreparedbythismethod,andoneofthebatcheswasascertainedtobebacterialendotoxinnationalstandardmaterialbyphysicalchemicalandbiologicalactivityassay1Aseriesofco
6、mparisonwerecarriedoutbetweenbacterialendotoxininternationalstand2thard,nationalstandard(the6batch)andJapanesenationalstandard1RESULTSNo13endotoxinmaterialshowedthebestbiologi2calactivityandlowestimpuritycontent1CONCLUSIONThreebatchesofendotoxinmaterialalmos
7、thavethesamebiologicalactivi2ty,physicalandchemicalcharacter.Theextractmethodhasgoodstabilityandreproducibility1Comparedbybiologicalactivityandim2puritycontent,theNo13endotoxinmaterialcanbeusedforpreparingnewbatchofbactericalendotoxinnationalstandardmaterial
8、1KEYWORDS:endotoxin;bacterialendotoxinnationalstandard;hotphenol2water药品生产质量管理规范生产条件下的制药过程目前我国使用的第6批细菌内毒素国家标准品中存在的热原通常是革兰阴性菌细胞壁的脂多糖在赋形剂的选择、标定的标准和方法与国际标准品(即内毒素,endotoxin),目前广泛应用细菌内毒素检均相同,但其原料只有部分
