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《Calponin_1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、2010;30(6)南方医科大学学报(JSouthMedUniv)·1369·Calponin-1表达沉默对子宫平滑肌细胞生物学行为的影响谷永红122131病理科，2妇产科，湖南长沙410013；3中，周昌菊，胡灵玉，陈倩，张卫社（中南大学湘雅三医院南大学湘雅医院妇产科，湖南长沙410008）摘要：目的研究抑制calponin-1表达对人子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡和细胞骨架的影响，探讨妊娠时人子宫平滑肌细胞中calponin-1蛋白表达上调在分娩发动中的作用机制。方法构建腺病毒siRNA-ca
2、lponin-1质粒，转染原代培养的人子宫平滑肌细胞，分别用四甲基偶氮唑蓝（MTT）、Transwell侵袭实验和流式细胞术（AnnexinV/PI双染法）检测转染siRNA-calponin-1前后对子宫平滑肌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响；同时用Rhodamine-Phalloidin标记子宫平滑肌细胞骨架蛋白（F-actin），荧光显微镜观察其变化并进行荧光定量检测。结果实验组与空载体组、空白对照组比较，子宫平滑肌细胞的运动能力明显下降（P<0.05），细胞增殖能力及凋亡率无明显差异（P>0.0
3、5）；空载体组与空白对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。实验组子宫平滑肌细胞中F-actin的含量减少，排列松散、不规则、微丝较细；空载体组、空白对照组子宫平滑肌细胞中F-actin微丝明显增多增粗、呈束状平行排列。结论体外实验表明抑制calponin-1的表达可以抑制子宫平滑肌细胞的运动而不影响其增殖和凋亡，并可引起子宫平滑肌细胞F-actin的形态变化与重排。此结果提示：妊娠时子宫平滑肌细胞迁移能力的改变及F-actin的重排，可能是导致分娩发动的重要机制之一。关键词：calponi
4、n-1；RNA干扰；分娩发动中图分类号：R329.28文献标识码：A文章编号：1673-4254(2010)06-1369-04Effectsofcalponin-1genesilencingonthebiologicalbehaviorofuterinesmoothmusclecellsGUYong-hong1,ZHOUChang-ju2,HULin-yu2,CHENQian1,ZHANGWei-she31DepartmentofPathology,2DepartmentofObstetrics
5、andGynecology,ThirdXiangyaHospital,CentralSouthUniversity,Changsha410013,China;3DepartmentofObstetricsandGynecology,XiangyaHospital,CentralSouthUniversity,Changsha410008,ChinaAbstract:ObjectiveTostudytheeffectsofcalponin-1expressioninhibitionontheprol
6、iferation,invasiveness,apoptosisandcytoskeletonofuterinesmoothmusclecells,andexplorethemolecularmechanismofcalponin-1intheuterinesmoothmusclecellsforlaboronset.MethodssiRNA-calponin-1adenovirusplasmidwasconstructedandtransfectedintoprimarilyculturedut
7、erinesmoothmusclecells.Theproliferation,invasivenessandapoptosisofthecellsweredeterminedbyMTTassay,matrigelinvasionassaysandflowcytometry,respectively.Rhodamine-Phalloidinwasusedforlabelingfilamentousactin(F-actin),andthemorphologyandthedistributionof
8、F-actinwasobservedunderfluorescencemicroscopyandanalyzedquantitatively.ResultsThemotorabilityofuterinesmoothmusclecellsdecreasedsignificantlyaftertransfectionwithsiRNA-calponin-1adenovirusplasmid(P<0.05).Thetransfectedcellsshowedthinner,loosen
