山东籍汉族泛发性脓疱型银屑病患者发病中易感基因的定位研究

《山东籍汉族泛发性脓疱型银屑病患者发病中易感基因的定位研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、山东籍汉族泛发性脓疱型银屑病患者发病中易感基因的定位研究作者：周淑华王秀敏韩兆东杨磊张玉杰高昱魏义花作者单位：1滨州医学院附属医院皮肤【摘要】目的探讨HLA-DRB1、DQB1位点基因与银屑病的相关性，探讨HLA-DRB1、DQB1位点基因在山东籍汉族银屑病易感性中的作用。方法用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法，对36例泛发性脓疱型银屑病患者进行了HLA-DRB1、DQB1等位基因的分型，并分析了上述基因在各组中的分布。结果泛发性脓疱型银屑病患者组DR7、DQB1*0201、DQB1*0603频率较正常对照组显著增高。结论寻常型银屑病、关节病型银屑病与泛发性脓疱

2、型银屑病在发病机制方面存在共同的遗传易感基因，而后两者又有其特殊的遗传背景。【关键词】银屑病；寻常型；关节病型；脓疱型；HLA-DRB1；HLADQB1genesinpsoriasisinHanShandongChinese.MethodsPolymerasechainreaction-specificsequenceprimers(PCR-SSP)methodwasusedtotypeHLA-DRB1,DQB1subregionin36caseswithgeneralizedpustularpsoriasisandmatchedcontrolsubjectsofHannatio

3、nalityfromShandongProvince.ResultsTheresultsdemonstratedthatthefrequencyofHLA-DR7,DQB1*0201,DQB1*0603allelefrequencyinpatientswithgeneralized7pustularpsoriasisweresignificantlyhigherthanthoseincontrols.ConclusionTheabovementionedtwotypesofpsoriasishavesimilarityintheassociationbetweendiseasea

4、ndHLAclassIIgenessusceptibility.ThereweredifferencesamonginHLAdiseaseassociation.【Keywords】psoriasis,pustular,generalized,HLA-DRB1,HLA-DQB1泛发性脓疱型银屑病是银屑病的一种类型。1998年日本学者Ozawa等［1］对泛发性脓疱型银屑病与HLA抗原/基因相关性进行了研究，发现泛发性脓疱型银屑病的易感性与HLA-Cw1以及HLADQB1*0303明显相关，表明与泛发性脓疱型银屑病关联的HLA等位基因不同于寻常型银屑病。本研究的目的在于分析与研究山东

5、籍汉族泛发性脓疱型银屑病与HLA-II类基因的相关状况，探讨本病的病因、发病机制。1资料与方法1.1研究对象山东籍汉族泛发性脓疱型银屑病患者36例，其中男21例，女15例，年龄9～65岁。先前有寻常型银屑病病史并在寻常型银屑病基础上发病者19例，先前无寻常型银屑病病史者17例，在脓疱消失后均有过典型寻常型银屑病皮损。正常对照组为与患者同地区的，与患者无血缘关系的健康人群，共70例，年龄13～75岁，其中男35例，女22例。患者组与对照组年龄、性别比较无显著差异（P＞0.05）。71．2实验方法1．2．1基因组DNA的制备：分离静脉血白细胞，用饱和盐洗法提取基因组DNA。将DNA溶

6、解于0.3～0.4ml的TE缓冲液中。取2μlDNA样品，用紫外分光光度法检测样品的A值及双链DNA浓度，最后DNA均调整至100μg/ml。1．2．2系列标准DNA：由上海第二医科大学免疫室范丽安教授馈赠。1．2．3PCR-SSP方法检测HLA-DRB1、DQB1位点的基因型：特异性引物及阳性对照引物由中国医学科学院细胞生物研究所上海赛尔公司合成，引物浓度为50　pmol/μl。DRB1引物:13个上游引物，15个下游引物组成19对不同的引物对［１］；DQB1引物：7个上游引物，10个下游引物组成13对不同的引物对［２］。PCR反应：50μl反应体系中含有基因组DNA60　ng

7、，浓度为50　pmol/μl的上游引物和下游引物各2.5μl，阳性对照引物用量为特异性引物的1/5，10×PCR缓冲液5　μl，25　mmol/LMgCl25μl，2.5　mmol/LdNTP5μl，Taq-DNA聚合酶（Promega）1.5　u。扩增在DNA热循环扩增仪（PerkinElmer）上进行，共35个循环，扩增条件参考文献［1,2］。1．2．4基因型的确定：2%的琼脂糖凝胶电泳，100V稳压30min。紫外灯下观察，根据PCR产物的有无及大小确定基因型别。1．3统计