HBVM定量与HBVDNA检测的相关性研究

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1、HBVM定量与HBVDNA检测的相关性研究作者:冯瑶1,张乐之2,吴淑梅2,王智华3,方超平2【摘要】目的探讨HBVM与HBVDNA检测的相关性及定量检测HBVM的临床应用价值。方法荧光定量PCR定量检测HBVDNA,时间分辨荧光免疫分析法定量检测HBVM。结果三组患者血清中HBeAg检出率差异有显著性(P<0.01)。HBVDNA在102~103copy/μl时与HBVM无相关性(P>0.05);HBVDNA≥104copy/μl时与HBsAg及HBeAg成正相关(P<0.01),与HBsAb、HBeAb及HBcAb无相关性(P>0.05);三组患者中HBsA

2、g与HBsAb有相关性(P<0.01),HBeAg与HBeAb在HBVDNA≤107copy/μl时成负相关(P<0.01),HBVDNA≥107copy/μl时无相关性(P>0.05)。结论HBsAg和HBeAg抗原可作为监测HBV感染和复制的量化指标。动态监测HBVM的量能够反映机体对病毒感染的免疫反应情况,可作为观察临床病程、疗效的依据。【关键词】乙型肝炎病毒标志物;乙型肝炎病毒DNA;荧光定量PCR;时间分辨荧光免疫测定法【Abstract】ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetweenHBVDNAconcent

3、rationandserologicalmarkers’(HBVM)concentration,andtoexplorethesignificanceofqualifingtheHBVserologicalmarkers,concentration.MethodsTRFIAwas7usedtodetecttheconcentrationofHBVM,fluorescence-quantitativePCRwasusedtoqualifytheHBVDNAconcentration.ResultsInthreegrouppatients,thepositiveratesofH

4、BeAgweresignificantdifference(P<0.01).InIgroup(HBVDNA102~103copy/μl),theHBVDNAisnorelatedtoHBVM(P>0.05).WhentheHBVDNA≥104copy/μl,theHBVDNAiscloselyrelatedtoHBsAgandHBeAg(P<0.01),whiletheHBVDNAisnorelatedtoHBeAbandHBcAb(P>0.05).InthreegrouppatientsHBsAgisrelatedtoHBsAb(P<0.01).W

5、hentheHBVDNA≤107copy/μlHBeAgisrelatedtoHBeAb(P<0.01).WhentheHBVDNA≥104copy/μlHBeAgisnorelatedtoHBeAb(P>0.05).ConclusionTRFIAisasensitivemethodforHBVMquantification,whichcanmonitorpatient’sconditionandtherapeuticefficacy,andsuggesttheprognosisofchronichepatitis.HBsAgandHBeAgcanbemonitorH

6、BVinfectionandreproduce.【Keywords】HBVM;HBVDNA;fluorescence-quantitative;PCR;TRFIA随着全自动荧光定量PCR仪的问世,HBV7DNA定量检测在确诊HBV感染中的地位更加巩固,但因其操作环境和技术要求较高,价格比较昂贵等原因使其应用受到了一定限制。本文采用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)定量检测HBV阳性患者血清HBVM,探讨定量检测HBVM与HBVDNA的相关性,旨在寻找一种确诊HBV感染的简便易行的方法,现报告如下。1对象与方法1.1标本来源选自门诊及住院患者血清HBVDNA阳性(HBVDN

7、A≥5×102copy/μl)标本66例,其中男40例,女26例,年龄15~64岁。收集血清标本置-20℃冷冻保存待检。1.2仪器德国ROCHE公司Lightcycler荧光定量PCR仪;上海新波ANYTEST2000时间分辨荧光分析仪。1.3检测方法试剂HBVDNA采用FQ-PCR定量检测,试剂选用深圳匹基公司生产乙肝病毒(HBV)核酸扩增(PCR)荧光检测试剂盒;HBVM检测采用时间分辨荧光免疫分析法,试剂选用上海新波公司生产的乙肝血清标志物定量检测试剂盒;以上实验均严格按说明书操作。1.4阳性结果判断标准HB

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