科研部提供技术服务

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1、科研部目前能提供技术指导一览表根据科技处领导要求，现列出科研部能开展的各项实验室技术详细清单，以增进相关人员对科研部的了解，提高科研部实验室的使用效率。需要特别说明的是，实验室技术与研究项目的内容密切相关，但实验室技术名称不等于研究项目或研究内容名称。我们只能列出各项实验室技术名称，而无法列出研究内容或项目的名称，用实际例子说明如下。例如，“某基因单核苷酸多态性与某种疾病易感性的关系”，这属于研究项目的名称，其中的基因单核苷酸多态性检测需要在实验室完成，其方法至少有10种以上，而任何一种方法，都包括多种实验室技术，其中最基本的标本留取和处理，就需

2、要考虑以下至少5个方面：1）留取什么组织标本：通常为外周血；2）留取外周血：是否需要抗凝，最好抗凝（不抗凝的血标本也可以用，但对后续实验带来很大麻烦）；3）用什么抗凝剂：最好用EDTA或枸橼酸钠（用肝素也可以，但价格高，且有可能影响后续实验）；4）采血量：根据多态性位点数目、多态性位点检测方法等而定；5）血样处理（这涉及试剂配置、移液器使用、离心、标本保存等各种技术）：a．何时处理：最好当天，甚至需立即处理，也可以在1－2周甚至更长时间后处理；这需要综合考虑，如血细胞和血浆是否需要用于检测其他指标，这些指标是否受标本处理时间的影响，……；b．如果

3、不能及时处理，如何保存：4ºC保存，室温保存1－2天也可以，但未处理的抗凝血切忌冻存，因为冻融后红细胞溶血，部分白细胞也会裂解，影响后续实验，……；c．如何处理：需要综合考虑，是否需要保存血浆，是的话，先离心，吸取血浆，保存；再裂解红细胞，留取白细胞，分装……，保存……。因此，此清单仅作为参考，不能机械地根据此清单判断科研部能否对您的课题提供技术支持。请在课题开始前，电话或来科研部咨询相关事项。根据需要，我们也可以派人到贵科室提供咨询服务。另外，因为实验室技术的通用性，此清单中未列出的项目，只要没有仪器或试剂的特殊要求，本部门多数也能开展。鼓楼医

4、院科研部2016.1.184一、实验室基本技术：1)试剂瓶和实验器材的清洗2)试剂选择3)试剂称量与配制4)血液、组织等样本的收集与保存5)仪器或设备的使用：具体仪器和设备见清单，使用时请参见本实验室各仪器的SOP。二、分子生物学相关技术：1)人及各种动物基因组DNA抽提、浓度测定2)人及各种动物组织或细胞RNA提取、浓度测定3)琼脂糖凝胶电泳（DNA；RNA）4)琼脂糖凝胶DNA回收5)RNA电泳6)Southernblotting(DNA转印技术)7)Northernblotting(RNA转印技术)8)普通PCR9)巢式PCR10)逆转录P

5、CR11)荧光定量PCR12)梯度PCR13)PCR产物（DNA片段）纯化14)基因突变（点突变或缺失突变）技术15)感受态细胞制备16)DNA连接17)DNA克隆（T-A克隆、质粒构建等）18)质粒DNA制备19)质粒抽提20)MicroRNA、mRNA检测21)基因过表达22)基因沉默23)引物设计24)DNA测序25)DNA片段分析26)SNP检测27)分子克隆技术：蛋白原核和酵母表达质粒构建、蛋白原核表达、纯化4三、蛋白质相关技术：1)各种组织裂解及蛋白抽提（总蛋白、胞浆蛋白、膜蛋白及核蛋白提取）2)蛋白质定量3)SDS-PAGE电泳及考

6、马斯亮蓝染色4)蛋白表达质粒构建、蛋白原核表达、纯化（盐析、亲和层析等）5)蛋白真核细胞（包括哺乳动物细胞、酵母细胞）的表达和纯化6)蛋白质超速离心分析：密度滴度离心、浮力密度分析、微量蛋白浓缩、纯化等四、免疫学分析技术（检测各种抗原、抗体、各种蛋白质分子）：1)ELISA2)免疫组化3)HE染色4)免疫沉淀5)免疫荧光6)荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization，FISH）7)Westernblotting(蛋白质转印技术)8)液相芯片分析检测各种细胞因子9)固相酶联免疫斑点技术10)免疫动物的抗原制备五、细

7、胞学分析技术（用于各种以细胞为基础的研究）：1)传代细胞培养、复苏和冻存2)原代细胞分离与培养3)细胞转染技术4)细胞增殖检测5)细胞毒性检测6)细胞凋亡检测7)细胞周期检测8)细胞迁移/划痕实验9)细胞转染和筛选10)流式细胞仪检测11)流式细胞仪分选细胞12)免疫磁珠分选细胞13)细胞氧化应激检测14)人和各种动物外周血淋巴细胞分离15)细胞核提取41)线粒体提取2)干细胞原代培养和鉴定（免疫标记鉴定、成骨、成软骨、成脂鉴定及尼氏体检测等）六．组织病理切片和显微镜分析技术：用于各种形态学成像分析1）包括石蜡切片及冰冻切片2）普通光学显微镜术：

8、常规切片、免疫组化等3）普通光学倒置显微镜术：培养瓶或板的常规观察或免疫组化等4）普通荧光显微镜术：常规切片的免疫荧光分析等5）普通荧光