烧伤修复机理的研究

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1、中国协和医科大学;中国医学科学院博士学位论文烧伤修复机理的研究姓名：王计奎申请学位级别：博士专业：人体解剖与组织胚胎学指导教师：许增禄2002.6.1AmpBSAcDNAdDCSDEPCEBECMEDTAFCSGAPDHhH-EKanKDLBMEDmlnMMPmRNANBTODPAGEPBSPCR英文缩略词表AmpicillinbovineserumalbumincomplementaryDNAdayavidinDcellsorterdiethylpyrocarbonateethidiumbromideextracellularmatrixethylenediaminetetraacetic

2、acidfetuscalfserumglyceraldehydes-·3—·phosphatedehydrogenasehourhematoxylin·eosinkanamycinresistancekilo-daltonLuriaBertaniN，N，N，N-tetra-methylethlenemethydiamineminutematrixmetalloproteinasemessengerRNAnitrotetrazoliumbluechlorideoptiealdensitypolyacrylamineelectrophoresisgelphosphatebufferedsalin

3、epolymeraseChainReaction氨苄青霉素牛血清白蛋白互补脱氧核糖核酸天抗生物素蛋白细胞分类剂焦碳酸二乙酯溴化乙锭细胞外基质乙二胺四乙酸胎牛血清甘油醛．3．磷酸脱氢酶小时苏木素一伊红卡那霉素千道尔顿LB培养基四甲基乙二胺分钟基质金属蛋白酶信使核糖核酸氯化硝基四氮唑蓝光密度聚丙烯酰氨凝胶电泳磷酸盐缓冲液聚合酶链反应!里坐塑堕型叁兰坚!：兰垡笙兰—一————————!-PPdPVPrpmRNaseP-phenylenediamine对苯基二胺polyvinylpyrrolidoneroundperminuteribonuleaseRT．PCRreversetranscriptio

4、nPCRSSDSSSCTBETETrissecondsodiumdodecylsulfatesodiumchloride，sodiumcitratebufferTris·C1，borate，EDTAbufferTris·Cl，EDTAbuffertrishydroxymethylaminomethane聚乙烯毗咯烷酮每分钟转数核糖核酸酶逆转录PCR秒。十二烷基磺酸钠氯化钠柠檬酸钠Tris·Cl硼酸EDTA缓冲液"Iris．ClEDTA缓冲液三羟甲基氨基甲烷皇里坐塑墨型查堂坚主鲎垡堡兰一————————————————L摘要随着发育生物学、分子生物学等生命科学的飞速发展和组织工程、干细胞工程等

5、技术的进步，人们对烧(村)伤堡堑、组织再生的认识更加深刻。烧(创)伤治疗技术有了更大的提高。但烧(创)伤修复是一个极其复杂的生物学过程，完美的皮肤修复不仅包括表皮和真皮的完美再生(如表皮无色素沉淀，真皮无瘢痕)，还包括表皮附属器的再生，血管和外周神经的修复等。烧伤湿性医疗技术是一种较新的烧(创)伤治疗方法，也是卫生部首批十年百项成果推广项目。有临床实验表明：湿润烧伤膏能加速伤口愈合，减少瘢痕的发生率和降低创面感染率等效果。虽然烧伤湿性医疗技术在临床上已得到了一定的推广，但其作用机理、特别是细胞水平和分子水平的研究甚少。本实验的目的是：在细胞水平研究了湿润烧伤膏治疗的患者摩修复过程中烯伤部位的

6、病理学变化和胶原的变化；在分子水平研究了I型胶原(type1collagen)、基质金属蛋白酶1(MMP．1)、整合素∞(in_cegrin西)、整合素pl(integrinpl)、转化生长因子pI(TGF．p1)的时空变化，同时也研究了MMP—l、整合素a3、整合素pI与Smad3的关系并探讨了其功能。为深入研究这些因子特别是Smad3在烧伤修复中的作用提供了一定的理论基础和实验依据。一、(旨先，我们通过H耳染色观察了、湿润烧伤膏治疗的患者在修复过程中烧伤部位的病理学变化。在烧伤后第二十四小时，伤口表面未发现血凝块，炎症反应较轻；在烧伤后第四天，凝固的团块状坏死组织较大，炎症细胞浸润，组织

7、水肿，第七天；伤口表面有较厚的渗出层，渗出层下凝固的团块状坏死组织变小，团块状坏死组织周围是炎症细胞，这一时期炎症反应强烈，坏死组织下有增生的肉芽组织；在烧伤后第十天，新生表皮出现，部分表皮脚下延，真皮中团块状坏死组织消失，大量炎症细胞浸润，皮肤附属器增生。烧伤后第十四天，新生血管数量达峰值，炎症反应增强。烧伤后第二十一天。炎症反应减轻，成纤维细胞增多，新生血管减少。烧伤后第二十八天，表皮增厚并出现角质化。真