pyrosequencing-军科院

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1、ANewLightonDNA基因有限公司市场部王小彬Pyrosequecing技术在SNP分析分子诊断和甲基化研究中的应用一种全新的DNA分析技术；一套完整的实验方案；诸多领域的广泛应用……PyrosequencingUppsala,Sweden,housesPyrosequencingheadquarters瑞典的Biotage公司致力于应用其专利的PyrosequencingTM技术，发展、制造和销售全套应用于遗传分析的解决方案。他们的PyrosequencingTM技术是一项通过酶级联反应系统进行的全新的革命性的序列分析技术，它

2、独特的技术原理，高度精确可靠的结果，简便的实验操作，使得其该公司在DNA分析领域处于领先地位，并在全世界范围得到了广泛的认同。他们的产品在众多制药、生物技术和农业生物技术公司以及著名的学院和研究所被广泛地采用。一.什么是Pyrosequencing？一种新型的基于酶级联反应的新型测序技术Sanger法测序PPiATPPrincipleofPyrosequencingDetectionofthelightlighttimeNucleotidesdispensedsequentially12345678910110-1AAGCTGThese

3、quenceinthispyrogram™isAGGCAGAGGCAG二.Pyrosequencing技术的流程PCR产物试样预处理，获得PCR单链Pyrosequencing序列分析15min/96sampleSQA:35min/96sampleSNP:10min/96sample1-2h/96sample遗传变异突变检测序列分析定量分析遗传作图品种鉴定病菌鉴定克隆检验...等位基因频率分析(AQ)单点或多个SNP频率分析插入/缺失频率分析杂和性缺失CpG甲基化多倍体基因组SNPBi-allelicSNPsTri-andtetra-a

4、llelicSNPsMultipleSNPsMultiplexingHaplotyping三.PSQ96MAfunctionality已知位点热点区域内的未知位点点突变插入/缺失多重突变多路分析临床微生物研究----快速病毒、细菌的分型与鉴定炭疽热（Bacillusanthracis）细菌的快速鉴定与毒性分析百日咳杆菌和副百日咳杆菌的快速鉴定和分型幽门螺旋杆菌（Helicobacterpylori）快速鉴定与抗药性分析Pyrosequencing技术用于革兰氏阳性菌的鉴定李斯特杆菌（Listeriamonocytogenes）的检测和

5、鉴别丙肝病毒的基因型研究快速监控HIV病毒对蛋白酶抑制剂的不同抗性......见Pyrosequencing快速DNA分析系统在CDC系统中的应用TargetmultipleorganismswithoneprimersetM.paratubeCGGATGAGTTGGCTGGGCGGCCGCGGCTCGTATC-----------------------------CCGAGTCGAGGAAAGTCCGGACTTCACAGAGCAGGGTGATM.bovisCGGATGAGTTGGCTGGGCGGCCGCGGCTCGCGTAGGGCT

6、TGTGTGGATTCACGAGGTTCAGCGTCGAGTCGAGGAAAGTCCGGACTTCACAGAGCAGGGTGATM.micCGGATGAGTTGGCTGGGCGGCCGCGGCTCGCGTAGGGCTTGTGTGGATTCACGAGGTTCAGCGTCGAGTCGAGGAAAGTCCGGACTTCACAGAGCAGGGTGATM.tuberculCGGATGAGTTGGCTGGGCGGCCGCGGCTCGCGTAGGGCTTGTGTGGATTCACGAGGTTCAGCGTCGAGTCGAGGAAAGTCCGGACTTCA

7、CAGAGCAGGGTGATM.gastriCGGATGAGTTGGCTGGGCGGCCGCGGCTCGAGTC-----------GGTTCGCAAGGACCGGCGCCGAGTCGAGGAAAGTCCGGACTTCACAGAGCAGGGTGATM.kansasiiCGGATGAGTTGGCTGGGCGGCCGCGGCTCGAGTT-----------GGTTCGCAAGGATCGGCGCCGAGCCGAGGAAAGTCCGGACTTCACAGAGCAGGGTGATM.marinumCGGATGAGTTGGCTGGGCGGCCGC

8、GGCTCGGGTTGGGCTCGT--GTTATCACGAG-TTCAGCGCCGAATCGAGGAAAGTCCGGACTTCACAGAGCTGGGTGATM.gordoniiCGGATGAGTTGGCT