aqp7在棕榈酸对3t3-l1脂肪细胞影响中的作用及其信号通路初探

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1、AQP7在棕榈酸对3T3-L1脂肪细胞影响中的作用及其信号通路初探研究生陈强导师陈永松主任医师专业内分泌2011年5月研究背景提出假设研究目的与意义实验设计实验方法实验结果展望和不足致谢研究背景近年来，肥胖患者数量增加很快。肥胖与胰岛素抵抗（IR）关系密切。肥胖患者脂代谢旺盛，血（游离脂肪酸）FFA高于正常人。高FFA血症通过多种途径导致胰岛素抵抗的发生。研究背景水通道蛋白7（AQP7）有促进甘油释放作用，减少TG合成。肥胖患者脂肪组织AQP7低表达。AQP7表达缺失障碍会出现IR。Glycerokinase研究背景PPARγ是AQP7上游调控因子。

2、PPARγ可以在转录水平对AQP7进行正调控。PPARγ？FFAAQP7在FFA导致IR中是否起到一定作用？FFA是否通过PPARγ途径影响AQP7表达？提出假设肥胖AQP7？IR研究目的与意义AQP7在FFA导致的IR中的作用。初步探讨FFA与AQP7之间信号通路。为肥胖防治IR提供新的靶点。实验设计3T3-L1前脂肪细胞成熟脂肪细胞对照酶比色法测定葡萄糖甘油水平棕榈酸浓度组棕榈酸时间组RT-PCR测AQP7和PPARγmRNA表达情况油红O鉴定统计分析实验方法3T3-L1前脂肪细胞培养3T3-L1前脂肪细胞诱导分化油红O染色法鉴定细胞内脂滴酶比色

3、法测定培养基葡萄糖和甘油RT-PCR测AQP7和PPARγmRNA表达情况结果统计RT-PCR结果用Quantityone软件进行灰度分析。计量数据使用SPSS17.0统计软件进行正态性检验和方差分析、组间比较及相关性比较，P<0.05差异具统计学意义，P<0.01具显著性差异。实验结果3T3-L1前脂肪细胞诱导成熟和鉴定A:小鼠3T3-L1前体脂肪细胞诱导前形态B:诱导分化成熟的脂肪细胞C:油红O染色的成熟脂肪细胞（200×）ABC实验结果培养基葡萄糖浓度变化不同浓度的棕榈酸作用24h后培养基中葡萄糖浓度的变化,*P<0.01（与对照组相比）实验结

4、果培养基中甘油的变化不同浓度的棕榈酸作用24h对脂肪细胞甘油释放的影响,*P<0.01（与对照组相比）实验结果RT-PCR结果AQP7与PPARγ的RT-PCR与内参对比条带实验结果棕榈酸对AQP7mRNA表达的浓度效应不同浓度棕榈酸作用24h对AQP7mRNA表达的影响,*P<0.05（与对照组比）实验结果榈酸对于AQP7mRNA表达的时间效应200uM棕榈酸对AQP7mRNA表达的时间效应,P<0.05（12h组与48h组比，24h组与48h组比）实验结果棕榈酸对PPARγmRNA表达的浓度效应不同浓度棕榈酸作用24h对PPARγmRNA表达的影

5、响,*P<0.05（与对照组比）实验结果棕榈酸对PPARγmRNA表达的时间效应200uM棕榈酸对PPARγmRNA表达的时间效应,P<0.05（12h组与48h组比）实验结果AQP7与PPARγmRNA相关分析AQP7与PPARγmRNA表达相关性分析，r=0.6749，P＜0.01讨论1、AQP7可能参与了游离脂肪酸导致的胰岛素抵抗FFA可以导致脂肪细胞胰岛素抵抗的发生。甘油释放减少主要因为脂肪细胞的甘油通道AQP7表达减少。游离脂肪酸（FFA）抑制AQP7表达，AQP7在游离脂肪酸导致的胰岛素抵抗中起到了作用。讨论2、FFA、PPARγ与AQP

6、7之间可能存在的信号通路FFA对PPARγ表达有抑制作用，是导致AQP7表达减少的原因之一。FFA可能是通过PPARγ这一核受体影响AQP7表达。结论1、棕榈酸可能通过影响脂肪细胞AQP7表达，进而促进脂肪细胞胰岛素抵抗。2、棕榈酸可能通过PPARγ这一核受体，进而影响脂肪细胞AQP7的表达。本研究不足不足：没能在蛋白水平进一步证实FFA与AQP7的关系。对FFA与AQP7之间信号通路也只是初步的涉及。致谢首先衷心感谢尊敬的导师陈永松老师三年来对我的精心指导和培养。恩师严谨的治学态度、高尚的人格魅力、渊博的学识、进取的精神是我们永远学习的榜样。感谢导

7、师在学习生活上给予我的关心和帮助，在论文的选题、课题设计以及论文完成过程中，给予的严格指导。衷心感谢附一分子实验室张勇刚主任、吴利标老师,内分泌科李卫平老师在实验过程中所给予的指导和帮助。衷心感谢附一内十科医护人员在我临床实习期间所给予的悉心指导。衷心感谢师兄师姐、师弟师妹及08级朋友们对我学习和生活上的帮助。再次感谢答辩主席和各位答辩委员的辛勤劳动。谢谢大家！