森林脑炎疫苗

《森林脑炎疫苗》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、KKME---专业医学搜索引擎http://www.kkme.net/森林脑炎疫苗拼音sēnlínnǎoyányìmiáo药典标准药品名称森林脑炎疫苗拼音名SenlinnaoyanYimiao英文名TICK-BORNEENCEPHALITISVACCINE来源(分子式)与标准本品系用森林脑炎病毒“森张”株，接种于地鼠肾单层细胞上，培养后收集病毒液，经甲醛溶液杀灭病毒后制成。性状本品为红色澄明液体。不应有任何异物。检查照《中国生物制品规程》中森林脑炎疫苗制造及检定规程的各项规定，进行试验，均应符合规定。类别生物制品。剂量皮下

2、注射用量照说明书的规定。贮藏在2～8℃的暗处保存。森林脑炎疫苗制造及检定规程[1]森林脑炎疫苗系用森林脑炎病毒“森林”株接种于地鼠肾单层细胞，培育后收获病毒液，加入甲醛溶液将病毒灭活后制成。用于预防森林脑炎。毒种1.1　毒种来源卫生部长春生物制品研究所保存之冻干毒种“森林”株。每3～5年会同中国药品生物制品检定所应用新分离的流行株病毒攻击，检测“森林”株的保护力，以了解该毒株的有效性。1.2　毒种检定1.2.1　无菌试验毒种启封及每次传代后，均需做无菌试验，合格者方可使用。1.2.2　病毒滴定每正代必须用小白鼠进行脑内滴定

3、。滴度≥KKME---专业医学搜索引擎http://www.kkme.net/9.0LogLD50/1.0ml方可用于生产。1.2.3　纯毒试验生产前须用小白鼠脑内法做中和试验鉴定毒种的特异性，中和指数必须在500以上。生产中如对毒种有怀疑，应及时进行鉴定。1.3　毒种传代分正亚代传递。传递代数正代不得超过15代，传代时选用体重10～12g健康小白鼠或乳鼠。每次毒种传代不得少于3个鼠脑。脑内接种病毒，72小时后选择眼结膜正常，有典型战栗、痉挛、肢体麻痹的小白鼠，处死后无菌取脑，并进行无菌试验。如发现污染者，应及时废弃。1.

4、4　毒种保存鼠脑毒种收剖经无菌试验后立即保存于-60℃以下，无菌试验通过后方可使用。亦可将鼠脑毒种研磨乳化制成10%脑悬液，分装小瓶，冻存于-60℃以下，无菌试验合格后备用。冻干毒种保存在2～8℃。森林脑炎病毒“森林”株属二类毒种，必须设专人按有关规定负责管理，使用前、后记录清楚。疫苗制造2.1　细胞制备2.1.1　地鼠选用2周龄左右的健康地鼠。如发现肾脏异常或有乳糜状腹水，应废弃。2.1.2　细胞消化及培养处死地鼠，无菌取肾，加入适量胰蛋白酶液消化。用营养液分散细胞，制备细胞悬液，分装培养瓶，于37℃进行培养。营养液中牛

5、血清含量不得超过8%。2.1.3　外源因子检查每生产批细胞留5%（或不少于500ml）悬液作为对照细胞检查外源病毒。该细胞除不接种病毒外，细胞尝试和处理均与生产过程平行进行。至原液收获之日，用显微镜观察，应无病变发生。并用0.2%～0.5%豚鼠红细胞（4℃保存不超过7天）进行血吸附试验，置4～8℃30分钟判定结果；再置20～25℃KKME---专业医学搜索引擎http://www.kkme.net/30分钟再次判定结果，均应为阴性。如有可凝病变或血吸附可疑阳性，在同种细胞上继续盲传，如传出病毒，该批细胞制备的疫苗应予废弃。

6、2.2　病毒接种和培育2.2.1　生产毒种配制将鼠脑毒种解冻乳化，制成10%～20%脑悬液，离心，取上清液作为毒种。亦可用冰冻鼠脑毒种悬液感染细胞。2.2.2　病毒接种和培育选择生长良好的细胞瓶，充分喷洗细胞后，加入适量含有病毒的营养液（病毒量不得大于7.0LogLD50/1.0ml），在适当温度下培育适当时间，弃去病毒培养液，换以新维持液，继续培育一定时间。2.2.3　疫苗生产过程中不得加青霉素或其他β内酰胺类抗生素。2.3　原液2.3.1　病毒灭活选择有典型细胞病变的培养瓶，经肉眼检查无菌者进行澄清过滤，按瓶取无菌试验

7、及病毒滴定样品，取样后立即加甲醛溶液和硫柳汞，使甲醛的最终浓度为0.05%，硫柳汞为0.005%，置适当温度下灭活。无菌试验为接种琼脂斜面培养基，3天判定，长菌者废弃。2.3.2　过滤合并及取样单瓶无菌试验未长菌、灭活到期、病毒滴定合格的疫苗进行过滤合并，摇匀后做无菌试验，取安全试验和效力试验样品。安全试验每批合并检定疫苗量不得超过15万ml，效力试验每批合并检定疫苗量不得超过100万ml。检定批号和成品批号应一致。2.3.3　原液检定2.3.3.1　无菌试验按《生物制品无菌试验规程》进行。2.3.3.2　病毒滴定将滴定样

8、品做10倍系列稀释，取至少3个稀释度，每个稀释度病毒液脑内接种体重7～9g小白鼠4只，每只0.03ml，逐日观察，14天判定结果（3天内非特异性死亡者不计，）滴度≥KKME---专业医学搜索引擎http://www.kkme.net/7.0LogLD50/1.0ml判为合格。不合格者可重试一次。每个滴定