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1、天然产物抗氧化活性体外评价方法如下参考资料：刘微微，任虹*，曹学丽，等.天然产物抗氧化活性体外评价方法研究进展【J】，食品科学，2010，31（17）：415-419基本内容：目前研究评价抗氧化活性的方法主要有化学测定方法和细胞抗氧化评价方法，本文综述了这两类抗氧化活性测定方法的作用机制及其技术进展。1.抗氧化的化学测定方法：主要在化学反应容器中采用自氧化反应方法，测定抗氧化剂针对某一种或某一类自由基的清除或抑制作用，作用机制主要有以下几点：1)抗脂质过氧化；2)清除或抑制自由基；3)影响抗氧化酶的生物活性；4)减少DNA的氧
2、化损伤。2.抗氧化活性的细胞评价方法：目前，Liu等[33]和Wolfe等[34-35]提出了抗氧化活性的细胞筛选方法(cellularantioxidantactivityassay，CAA)，以结肠癌细胞Caco-2、肝癌细胞HepG2及乳房癌细胞MCF-7为靶细胞，以2＇,7＇-二氯荧光黄二乙酯(DCFH-DA)为荧光探针，在细胞水平上检测抗氧化剂对自由基氧化作用的抑制效果（与传统的“试管”化学测定方法相比，在开发抗氧化药物方面，CAA评价方法更具可靠性和说服力，日益被人们认可，对日后抗氧化剂的研究开发将产生更大价值。）
3、具体选取的抗氧化实验方案1.DPPHradicalscavengingactivity(SuteeUdomchotphruet,PreechaPhuwapraisirisan,JirapastSichaem,al.XanthonesfromthestemsofCratoxylumcochinchinense.Phytochemistry.2010,配制：DPPH——用甲醇配成0.3mM溶液样品及Vc——用甲醇溶解配成不同浓度（10，25，50，100，250，500，1000ug/ml，参照PhilipJacobP,Madhu
4、mithaG,MarySaralA.FreeradicalscavengingandreducingpowerofLawsoniainermisL.seeds.AsianPacificJournalofTropicalMedicine.(2011)457-461）操作：取样品50mL，DPPH溶液200mL于96孔板，混匀后，室温避光反应30min，在分光光度计上于517nm处测定吸光值。实验重复3次，取平均值计算Abssample-AbsblankAbscontrol)×100%清除率（%）=（1-Abssample：DPP
5、H·乙醇溶液与样品溶液Absblank：乙醇与样品溶液Abscontrol：DPPH·乙醇溶液Ac2.5mlDPPH·+1.5ml65%乙醇As2.5mlDPPH·+1.5ml样品液Ab2.5ml65%乙醇+1.5ml样品液DPPH分子式C18H12N5O6分子量:394.32铁离子还原力测定（ferricionreducingantioxidantpower，FRAP)原理：利用抗氧化剂将三吡啶三嗪三价铁[TPTZ-Fe3+]还原为蓝色的三吡啶三嗪二价铁[TPTZ-Fe2+]，反应结果常以Fe2+当量表示。FRAP法简便、快
6、捷、灵敏度高、重现性好。刘微微，任虹*，曹学丽，等.天然产物抗氧化活性体外评价方法研究进展，食品科学【J】,2010,vol.31,No.17:415-419Theferricreducing/antioxidantpower(FRAPassay)iswidelyusedintheevaluationoftheantioxidantcomponentsofdietarypolyphenols.TheFRAPassaydependsonthereductionofaferrictripyridyltriazine[Fe(III)
7、-TPTZ)2]complextotheferroustripyridyltriazine[Fe(II)-TPTZ)2]byanantioxidant,usuallyanonphysiologicalconditionwithlowpHofabout3.6.AMITABYELUXIMON-RAMMA,†THEESHANBAHORUN,*,†AntioxidantActivitiesofPhenolic,Proanthocyanidin,andFlavonoidComponentsinExtractsofCassiafistul
8、a，J.Agric.FoodChem.2002,50,5042-5047TheFRAPassayisinexpensive,reagentsaresimpletoprepareresultsarehighlyreproducible,andtheprocedureisstra
