教案微生物的实验室培养教案.doc

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1、按住Ctrl键单击鼠标打开教学视频动画全册播放课题1微生物的实验室培养【课标解读】1、知道培养基的基础知识，进行无菌技术的操作2、进行微生物的培养【教学重难点】无菌技术的操作【教学过程】（一）引入新课2007年7月1日，由国家标准委和卫生部联合发布的《生活饮用水卫生标准》（GB5749-2006）强制性国家标准和13项生活饮用水卫生检验国家标准正式实施。新标准中的饮用水水质指标由原标准的35项增至106项，增加了71项。其中，微生物指标由2项增至6项，其中大肠杆菌要求每公升水中不得超过3个。你用什么办法将他们找到并准确计数？在传统发酵技术的应用中，都利用

2、了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。（二）进行新课一、基础知识1、培养基（阅读教材）1.1概念（略）1.2培养基的种类(1)形态——固体和液体培养基（琼脂）(2)成分——天然和合成培养基(3)作用——选择和鉴别培养基思考：1、固体培养基和液体培养基你认为哪个更适合工业生产？为什么？2、如何区分S型细菌和R型细菌？3、什么是菌落？【补充】培养基的类型及其应用：（创新设计

3、）标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离,鉴定,计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保存液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成合成培养基由已知成分配制而成，培养基成分明确菌种分类、鉴定天然培养基由天然成分配制而成，培养基成分不明确工业生，产降低成本目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加（或缺少）某种化学成分菌种的分离1.3培养基的化学成分（教材资料）思考：1、硝化细菌、蓝藻与酵母菌的C源和N源有不同吗？能源呢？2、结合细胞元素组成说明大多数培养基的组成为何有4类？一定都需要吗？1.4培养条件—

4、—营养物质（特殊营养物质—生长因子）、PH、氧气思考：1、微生物的营养物质就是4类吗?牛肉膏和蛋白胨能为微生物提供哪些营养？2、特殊营养物质是什么？试举一例。(介绍生长因子)3、你能将土壤中酵母菌、硝化细菌、乳酸菌、固氮菌分离出来吗？说一说最佳方案。4、分离菌种是否一定要选择培养基？培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。2、无菌技术（阅读并思考回答下列问题）2.1意义、对象2.2消毒与灭菌的区别比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物

5、不能灭菌强烈全部微生物能思考：芽孢是什么？为什么难杀死？（灭菌标准）2.3消毒与灭菌的方法、适用对象思考：1、什么是巴氏消毒法？灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌特别注意什么？2、以下各项分别适用哪项无菌技术？简单说明理由试管口；培养基；接种操作间；葡萄酒；培养皿；接种针（环）；口罩；手；空气；饮用水3、无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有什么目的？二．实验操作（录像）1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基程序：计算—称量—溶化—调pH—灭菌—倒平板思考：1、为何将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯溶化？2、制备过程中要调节适宜的PH值，要在哪一个环节操作？为什么？3、请阅读倒

6、平板操作（P17）并回答讨论1—44、试管培养基常制成斜面的作用是什么？2、接种（4种方法）2．1平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。其操作步骤是：2.1.1目的2.1.2平板划线操作（略）思考：请回答P18讨论1—32．2　稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。2.2.1目的2.2.2系列稀释操作：①取盛有9mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。②用

7、灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中，并吹吸3次，使之混匀。③从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。思考：为什么操作中试管口和移液管应在离火焰1～2cm处？整个操作过程中使用了几支移液管？2．2.3涂布平板操作思考：1、涂布器操作要点及原因2、教材P19讨论3、结果分析评价　3．1培养未接种培养基的作用是对照，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。3．2　如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请你分析原因？3．3　培养12h和24h后的菌落大小、位置相同吗？；原因是什么？。4、课题延伸频繁使用

8、的菌种利用临时保藏法保存，长期保存菌种的方法是甘油管藏法。前者利用固体斜面培养基