中药学专业综合实验报告--光照对番红花侧芽愈伤组织的影响

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1、中药学专业综合实验报告实验名称:光照对番红花侧芽愈伤组织的影响班级:13中药本学号:姓名:指导老师:南阳理工学院一、实验目的1.为了比较同浓度下不同光照条件对番红花侧芽愈伤组织的影响。2.从组织培养入手探究光照对番红花侧芽愈伤组织的影响,并期望能够通过本实验的研究而对实际生产产生有利的影响。二、实验方法取2016年**学院提供的无病虫害的番红花,将番红花上生长出来的幼嫩侧芽剪下,用纱布包着放在水龙头下冲洗过夜。配制培养基:取一干净的1000ml大烧杯,往烧杯内依次加入大量元素母液I、大量元素母液II、大量元素母液III、微量元素母液、铁盐母液、有机母液。在上述

2、装有试剂的大烧杯中,加入700ml蒸馏水,加热;用天平称取琼脂、蔗糖和活性炭放在一边备用;不断加热到沸腾,加入7g的琼脂,搅拌,然后加热至水透明,之后加入20g蔗糖,其间不断搅拌,加水到1000毫升,最后再加入生长素,搅拌使加入的所有成分充分混匀;调配PH至5.8-6。最终把培养基分别装在培养瓶里面。接种方法:接种人员最先开始清洗双手,上了工作台之后,使用酒精棉球擦拭双手,尤其是手指缝隙不易消毒的地方;之后再把工作台面擦抹一遍;首先酒精棉球擦拭接种器材,之后把镊子和剪刀依照顺序过火一回,火烤时应多次经过火焰顶端的地方,对培养皿需要过火烤至干燥;将已消毒的侧芽用

3、解剖刀切成0.5cm的小段(注:在每段上斜着切几条伤口。)等待接入培养基。接种前需要灼烧7-12s培养瓶口,将准备好的材料接入培养瓶。(接种时酒精灯火焰10cm范围内有火焰存在的细菌较少培养基不易污染。)接种时要时常重新对接种所要用到的镊子和解剖刀进行消毒。(接种工具不能一直用到接种结束都不消毒,这样可能会导致培养基污染。)接种结束用石蜡膜进行封口标注日期和分组,根据实验需要将需要分开培养的培养基分开培养。三、实验结果相同浓度不同光照下侧芽的萌动数侧芽接种于同一激素及浓度下,10天后开始萌动,20天后统计萌动率,有的侧芽的周围明显可见淡黄色或者半透明的愈伤组织

4、,这个时期称萌动期,各个培养基萌动数见表1。表1光暗条件下个愈伤组织的萌动情况比较激素浓度接种数萌动数萌动率%萌动期(天)24h黑暗402972.51012h光照4018451424h光照401537.519相同浓度不同光照下侧芽的诱导率番红花接种30天后,统计在不同培养基中侧芽愈伤组织的诱导率,情况见表2。表2光暗条件下瘀伤组织的诱导率比较激素浓度接种数出愈数诱导率%24h黑暗40225512h光照401537.524h光照401127.5相同浓度不同光照下侧芽愈伤组织的质地形成的愈伤组织质地蓬松容易形成棉花状愈伤组织,从而无法继续培养,各个培养基的质地情况

5、见表3。表3光暗条件下愈伤组织的质地比较激素浓度接种数出愈数疏松致密数量百分数%数量百分数%24h黑暗4022313.61986.412h光照4015746.7853.324h光照4011872.7327.3相同浓度不同光照下侧芽愈伤组织的颜色西红花侧芽愈伤组织容易褐化(褐化会导致组织代谢紊乱,生长受阻,最终逐渐死亡)或者部分褐化,通过观察侧芽愈伤组织的颜色可以判断愈伤组织的褐化程度,情况见表4。表4光暗条件下愈伤组织的色泽比较激素浓度接种数出愈数褐色黄色白色数量百分数%数量百分数%数量百分数%24h黑暗402229.1836.41254.512h光照4015

6、426.7853.330.224h光照4011872.7327.300相同浓度不同光照下侧芽愈伤组织的生长量西红花侧芽愈伤组织在不同培养基中光暗条件下的生长量不同,生长量大的说明愈伤组织更适合在这个条件下生长,表如下:表5光暗条件下愈伤组织生长量的比较激素浓度接种数出愈数生长量大生长量小24h黑暗402216612h光照40156924h光照401147四、讨论分析由表1、表2、表3、表4、表5的数据结果可知:番红花侧芽愈伤组织的色泽、质地、生长量、诱导率以及萌动期随着光照的时间的改变而不同。光照时间对以上指标的影响:萌动期:由表1在24h黑暗条件下培养的植株

7、萌动时间明显比在24h光照以及12h光照下培养的植株短,说明愈伤组织在黑暗条件下萌动得更快。色泽:由表4,可得随着光照时间的延长愈伤组织的色泽逐渐加深,由白色变为褐色。说明愈伤组织在黑暗条件下褐化率比光照条件下低。生长量:由表5得愈伤组织在24h黑暗条件下发育得比24h光照和12h光照下快,说明愈伤组织在没有光照的抑制的条件下长得更快。诱导率:由表2数据可知,24h黑暗培养对愈伤组织的诱导具有较强的促进作用。质地:根据表3中数据可得同浓度24h暗培养条件下的侧芽愈伤组织质地致密的株数占出愈数的百分比为88.2%,12h光培养和24h光培养所占百分比均比暗培养的

8、低。

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