2017-2018学年高中生物专题微生物的培养与应用专题整合提升同步备课教学案

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1、专题2微生物的培养与应用知识系统构建必背要语1.实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。2.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。长期保存菌种可以采用甘油管藏法。3.稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比实际活菌数目低。4.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作唯一氮源的选择培养基分离该细菌。5.鉴定分解尿素的细菌的方法是在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，据是否变红进行判断。6.纤维素酶的作用是：纤维素纤维二糖葡萄糖。7.刚果红与纤维素形成红色复合物。当纤维素被分解

2、后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。规律方法整合整合一　常见的消毒灭菌方法比较方法操作过程应用范围煮沸消毒法100℃煮沸5～6min日常生活中广泛使用巴氏消毒法在70～75℃煮30min或在80℃煮15min牛奶、啤酒、果酒和酱油等不宜进行高温消毒的液体化学药剂消毒法用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹，来苏水喷洒等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等紫外线消毒法30W紫外灯照射30min接种室空间消毒灼烧灭菌法酒精灯火焰灼烧微生物接种工具如接种环、接种针或其他金属用具等，接种过程中试管口或锥形瓶口等干热灭菌法干热灭菌箱160～170℃加热

3、1～2h玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属用具等凡不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品高压蒸汽灭菌法100kPa、121℃维持15～30min培养基及多种器材、物品例1　下列有关微生物培养与应用的说法，正确的是(　　)A.天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B.接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C.大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D.分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源答案　C解析　天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基；实验操作者的双手需进行消毒处理；分离分解尿素的细菌时，尿素是

4、唯一氮源但不是唯一的碳源。例2　微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，以防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是(　　)①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢　②接种操作要在酒精灯火焰附近进行　③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌　④培养基要进行高压蒸汽灭菌　⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A.①B.②③C.③④D.③⑤答案　D解析　无菌操作包括消毒和灭菌。需进行消毒处理的有操作人员的双手等，需进行灭菌的有器皿、培养基、添加剂(指示剂或染色剂)等。煮沸可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，属于消毒；为防止空气中的杂菌污染，接种时要在

5、酒精灯火焰附近进行；家庭制作葡萄酒时所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能灭菌；培养基常进行高压蒸汽灭菌。故③⑤操作错误。整合二　微生物的纯化培养技术1.技术流程2.流程解读(1)无菌技术：主要指消毒和灭菌，实验中对操作者和操作空间进行消毒，对实验用具和培养基进行灭菌。实验过程中严格遵循无菌技术。(2)倒平板：待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。(3)平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，培养后获得由单个菌体繁殖形成的菌落，从而实现菌种的纯化培养。(4)稀释涂布平板法：先将菌液进行系列梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的

6、菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落，实现菌种的纯化培养。易错易混　(1)自然界中多种微生物混杂在一起，研究菌种时需要将它们分离开来，微生物的纯化培养技术实现了菌种的分离。(2)平板划线法操作简单，常用于微生物的分离；稀释涂布平板法操作复杂，稀释度足够高时，培养基上生长的菌落大都是由单个细菌形成的，除用于微生物的分离外，还可进行细菌的计数。例3　1943年，曾获诺贝尔生理学或医学奖的美国科学家鲁里亚和德尔布吕克设计实验，研究大肠杆菌的抗噬菌体突变是发生在接触噬菌体之前还是之后。请阅读以下资料回答下列问题：培养皿中培养基的基本配方：配方蛋白胨乳糖KH2P

7、O4水琼脂20%伊红水溶液0.325%美蓝水溶液pH含量10g10g2g1000mL25g20mL20mL7.2～7.4(1)在培养基中加噬菌体的作用是；加伊红与美蓝的目的是。(2)由于大肠杆菌的同化作用类型是，因此，在培养基中还加入了一些相应的物质，其中是大肠杆菌生长的主要碳源，是氮源。(3)从生态学的角度看，噬菌体与大肠杆菌这两种生物之间的关系是。(4)该实验有两个假设：假设一：大肠杆菌的抗噬菌体突变发生在大肠杆菌与