蛋白质组学结课作业

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时间:2019-03-24

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1、蛋白质组学的目的是什么?答:蛋白质组学的最终目的是阐述生命细胞代谢、信号传导和调控网络的组织结构和动力学,并理解这些网络如何让在病理或生理中执行和失去功能,又如何通过干预(如药物和基因)改变它们的功能。分别论述基因组与蛋白质组的含义。答:基因组:人类、动物、植物和微生物等生物几包中的全部基因成为基因组。蛋白质组:由全套基因组编码控制的蛋白质相应的被成为蛋白质组。从整体上看,蛋白质组研究主要包括哪两个方面的内容?答:1•对蛋白质表达模式的研究,即蛋白质组组成的研究2.对蛋白质组功能模式的研究,即对鉴定出来的蛋白住功能进行研究。蛋白质组学研究的任务是什么?答

2、:1•诠释基因功能2.寻找功能蛋白质3.研究牛理和病理现象4.开发蛋白质资源5.进行基础研究蛋白质电泳技术由一向电泳技术发展为双向电泳技术,应用了蛋白质的哪些特性和参数?答:应用了各种蛋白质的等电点和分子量大小不同等技术将蛋白质分离。常规聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理是什么?SDS的作用是什么?答:常规聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的取代电泳,是恒定的,非电离的缓冲液系统中分离蛋白质,属于非解离电泳。在电泳过程中仍然保持蛋白质的天然构造,亚基之间的相互作用和生物活性,因而据其迁移速率,可得天然蛋白质的分子质量。SDS,即十二烷基硫酸钠,是

3、一种阴离子去污剂,作为变性剂和助溶剂,它能断裂分子之间和分子内德氢键,使分子折叠,破坏蛋白质分子的二级结构和三级结构。强还原剂,如B—硫基乙醇和二硫基糖醇则能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂,不易再氧化,保证了蛋白质分子与SDS的充分相互结合。等电聚焦电泳中,载体两性电解质PH梯度电泳于固相PH梯度电泳有何区分?答:载体两性电解质PH梯度电流,就是在支持介质中放入载体两性电解质在电场中构成连续的PH梯度,使蛋白质或其他具有两性电解质性质的样品进行聚胶,从而达到分离、测定和鉴定的目的。而固相PH梯度电泳是利用一系列具有弱酸或弱碱性质的丙烯酰胺衍生物滴定时,在滴

4、定终点附近形成PII梯度,然后将其共价键合在介质上,成为凝胶介质的一部分,从而形成固定的,不随环境电场等条件变化的PH梯度。与传统的载体两性电解质电泳相比,固相PH梯度等电聚胶具有更高的分辨率和可重复性,更好的PH稳定性,等大的上样量等优点。试分析在蛋白质组学的双向电泳技术中有多少种方法有助于蛋白质间分辨率的提高。答:1.可利用聚丙烯酰胺凝胶提高分辨率。2.在聚丙烯酰胺凝胶聚合前,调节单体的浓度來控制凝胶孔径的大小。3.通过减少蛋白质水解吋的扩散和对流来提高蛋白质I'可的分辨率。4.好的蛋白质样品有助于提高分辨率。质谱有哪些部分?各个部分的功能作用各有什

5、么?答:质谱有7部分:进样系统:供样品进入。离子源室:样品被气化、电离。质量分析室:正离子进入质量分析室将正离子按质荷比大小不同进行分离。检测器:检测器得到离子信号,放大并记录在记录仪上。数据处理系统:用于数据的接受,储存和处理。真空系统:供应这个质谱仪工作用电。供电系统:为质谱仪分析提供真空环境。在飞行时间质量分析器中,用什么方法来提高分子离子间的分辨率?答:减小加速电压,使离子的飞行吋问增加;增加漂移管的长度,使离子飞行吋间增加都可以提高分辨率。试述蛋白质分子解吸为分子离子的途径与过程。答:1•场解吸电离:将样品吸附在作为离子发射器的金属细丝上通过微

6、弱电流,即提供样品发射体上解吸的能量,使解吸出来的样品扩散到高场强的场发射区域进行离子化。亠2.二次离子:将Ar离子束经过电场加速后打在样品上,样品分子离子化,产生二次离子O2.快分子轰击:在快分子抢屮,从离子室屮射出的Ar离子经加速后,经过Ar分子室,在里面高能量的A「离子经电荷交换后,形成高能量的Ai■分子束,轰击样品分子使之离子化。3.基质辅助:在坡长为775〜1250nm的真空紫外光辐射下产生光致电离和解吸作用。4.电喷雾电离:采用强劲电电场,从喷雾形式使液体样品形成雾状小液滴,小液滴经过反复的溶剂挥发一一液滴分离后,产生单个带多电荷的离子。

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