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1、生化人题汇总探参与DNA复制的主要廨和蛋白因子有哪些?各有什么功能?拓扑界构酚:松解DNA的超螺旋。解链酶:打开DNA的双链。引物酶:在DNA复制起始处以DNA为模板,催化合成互补的RNA短片断。DNA聚合陋:以DNA为模板、dNTP为原料,合成互补的DNA新链。连接酶:连接DNA片断。DNA结合蛋白:结合在打开的DNA单链上,稳定单链。探DNA复制冇何主要特点?半保留复制,半不连续合成、需RNA引物,以dNTP(A,T,C,G)为原料,新链合成方向总是5?->3依赖DNA的DNA聚合酶(DDDP)探DNA复制的高保真性主要取决于哪些因素?DNA复制的高保
2、真性取决于三个方面:1、DNA双链碱基的严格配对与DNA聚合酶对配对碱某的严格选择性;2、5'3,外切核酸酶的即时校读作用;3、对DNA分子屮的错误或损伤的修复机制。探真核生物DNA复制在何处进行?如何进行?在细胞核内。复制分为以下儿个阶段:1、起始阶段(DNA解旋解链及引物合成):DNa拓扑异构酶、解链酶分别使DNA解旋、解链,形成复制叉,在起始点由引物酶催化合成RNA引物:2、DNA合成阶段:以DNA的两条链分別作为模板,dNTP为原料按碱基互补原则(A-T,C-G)在RNa引物引导下,illDNA聚合酶催化合成DNA新链(分前导链和随从链);3、终止阶
3、段:水解RNa引物(poll),填补空缺(poll),连接DNA片断(连接酶)。探何谓反转录?在哪些情况下发住反转录?写出主要酶促反应过程。以RNA为模板在反转录卿的作用下合成DNA的过程叫做反转录。反转录可发生于:1、在RNA病毒感染宿主细胞甚至致癌过程中;2、在基因工程中,以mRNA为模板合成cDNAo病毒RNA(反转录酶dNTP)->RNA-DNA杂化链(RNA酶活性)一>cDNA单链(DNA聚合酶活性)->cDNA双链探概述DNA的生物合成。DNA的主物合成包扌舌DNA半保留复制,DNA损伤后的修复合成和反转录DNA复制是以DNa的两条链分别作为模板
4、,以dNTP为原料,在DNA聚合酶作用下按照碱基配对原则合成互补新链,这样形成的两个子代DNA分了与原来DNa分子完全相同,一条链来自亲代,另一条链是新合成的,故称为半保谢复制。在某些梨花、生物学因素作用卞DNa链发生碱基突变、缺失、交联或链的断裂等损伤后,可进行修复。修复方式有光修复、切除修复、重组修复与SOS修复等。切除修复:1、核酸内切酶从损伤处的亍端切开,出现正常的3,端;2、核酸外切酶水解已打开的损伤DNA段;3DNA聚合酶以互补的DNA链为模板,dNTP为原料,5»>3,方向合成新的DNa片段;4、连接酶连接形成完整的DNA链。以RNA为模板在反
5、转录酶的作用下合成DNA的过程叫做反转录。反转录在病毒致癌过程中起重婆作用;在基因工程中可用于以mRNA为模板合成cDNA的实验。探催化磷酸二酯键形成的酶有哪些?比较各自不同特点。有DNA聚合酶、RNA聚合酶、引物酶、反转录酶、连接酶和拓扑异构酶。酶反应时限底物反应结果DNA聚合酶DNA复制或修复合成模板DNA、引物、dNTP合成互补DNA新链RNA聚合陆转录或RNA复制DNA/RNA模板、NTP合成RNA新链引物酶复制起始阶段起始点DNA模板、NTP合成RNA引物反转录酶反转录RNA模板、dNTP合成互补DNA连接酶DNa复制或修复合成双链DNA屮相邻片段
6、合成DNA长链拓扑异构酶DNA复制起始超螺旋DNA解旋DNA复制后松弛态DNA重新形成螺旋探比较复制与转录的异同模板均为DNA,都需耍聚合醐催化反应,聚合过程都是在核营酸ZI'可形成3,,磷酸二酯键,合成方向都是5,・>3,,都遵从碱基配对规则。不同点包括:复制使子代保留亲代的全部遗传信息,方式为半保留不连续复制:转录只是按照生存的需要表达部分遗传信息,方式为不对称转录。聚合酶分别是DNApol和RNApol,原料分别是dNTP和NTP,碱基配对RNA将A->T改为A->U,复制产物分别为DNA和RNA。探何谓不对称转录?用实验证明之在双链DNA小只有一股单
7、链作为模板;另外在同一条单链上可以交错岀现模板链或编码链。用核酸杂交方法:用热变性将DNA双链打开,并分离成两股单链分别与转录产物RNA杂交,由此鉴定出哪条链上的特异区段是转录模板。另外可以进行核酸序列测定。探试比较原核牛•物与真核牛•物RNA聚合陆有何界同?探举例说明转录后加工的主要类型。mRNA中主要有:1、剪接一去除内含子拼接外显子;2、末端添加核井酸:5,端加7甲基鸟嚓吟核井三磷酸,3,端加多聚腺昔酸尾;3、化学修饰:甲基化;4、RNA编辑:某些mRNA转录后还进行插入、删除和取代一些核昔酸残基方能生成具有正确翻译功能的模板。探讨论原核生物RNA聚合
8、酶各亚基的功能和在转录屮的作用。原核生物RNApol