昆仑雪菊提取物抗氧化活性研究希尔艾力艾尼瓦尔08343003

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1、中山大学生科院实验项目设计书昆仑雪菊提取物抗氧化活性研究希尔艾力艾尼瓦尔年级:08级专业:生态学电子邮箱:marxal@qq.com2012年3月7日—、立论依据(-)研究意义及研究现状:自由基是生物体正常代谢产物,如果自由基产生过多或清除过慢,则可引起体内自由基浓度升高.过量的自由基会攻击脂质、核酸和蛋白质等生物大分子,导致细胞结构和功能破坏[1].因此,自由基集聚是人类衰老和许多疾病如肿瘤、心脑血管病等的重要诱因.自由基对人体的攻击途径有来自体内的,也有来自外界的。自由基失去控制并在人体内自由基超过一定量时,这些自由基会

2、攻击细胞,跟基因抢电子,跟血清抗蛋白酶发生反应,是人体受到伤害。很多癌物必须在体内经过代谢活化形成自由基而攻击DNA才能致癌。寻找能够有效清除自由基而无毒副作用的抗氧化剂,用于预防和减轻上述疾病的发生和发展,是生物医学重要的研究课题之一.经初步研究新疆昆仑雪菊含有氨基酸、蛋白质、糖类、黄酮类、生物碱、皂昔、有机酸、酚类、恩酿类、挥发油、油脂、綃体、内酯及香豆素类等成分。[2]昆仑雪菊屮含具有营养保健功能的黄酮类、皂昔类、氨基酸类等活性成分。本实验通过研究昆仑雪菊提取物抗氧化活性研究为其药理作用研究奠定基础。目前有关昆仑雪菊的

3、研究很少,基本上是以研究化学成分和其含量为主。能够查到的有关文献也很少。(三)主要参考文献:[1]方允屮,郑荣梁.自由基生物学的理论与应用[M].北京:科学出版社,2002.⑵木合布力阿布力孜,张燕,景兆均,毛新民.新疆昆仑雪菊化学成分的初步定性研究.新疆医科大学学报JOURNA1OFXINJIANGMEDTCAIUNIVERSITY2010Jun033(6)[3]朱笃,陈飞彪.金鸡菊总黄酮的提取及含量测定[J]•食品科学,2005,26(9):314.[4]LxL,ZhouAG,IlanY.Anti-oxidationan

4、danti-microorganismactivitiesofpurificationpolysaccharidefromLygodiumjaponicuminvitro[J].CarbohydrPolym,2006,66(1):34.[5]金鸣。蔡亚欣,李金荣,等.邻二氮菲-Fe2+氧化法检测11202/Fe2+产生的轻自由基[J].生物化学与生物物理进展,1996,23(6):555.[6]吴春,陈林林.菟丝子黄酮体外清除自由基活性的研究[J].天然产物研究与开发,2005,17(5):553.[7]Concepcion

5、SM,JoseAL.Freeradica1scavengingcapacityandinhibitionof1ipidoxidationofwines,grapejilicesandrelatedpolyphenolieconstituents[J].FoodResTnt,1999,32(1):407.[8]STChow,WWChao,YCChaung.Antioxidativeactivityandsafetyof50%ethaolicredextract[J].JFoodSci,2003,68(1):21.二、研究方案(

6、-)研究目标、研究内容和拟解决的关键问题研究目标:研究昆仑雪菊提取物抗氧化活性。研究内容:不同气候生长的昆仑雪菊提取物抗氧化活性。拟解决的关键问题:1.不同气候生长的昆仑雪菊2.有效成分提収(黄酮类)1.数据收集、统计、处理的方法及结果分析方法(-)拟釆取的研究方法、实验方案及可行性分析研究方法1.昆仑雪菊有效成分提取2.测定提取物抗氧化活性(DPPH自由基的清除作用)实验方案(一)黄酮类化合物的提取1.分别准确称取100G寒冷气候生长的昆仑雪菊和温带地区生长的雪菊,分别放入1000ml烧杯A和B中。2.烧杯A和B中准确加入

7、500ml65%乙醇溶液。3.75°C水浴箱恒温水浴1.5ho4.取出烧杯,趁热过滤。5.滤液减压浓缩.蒸去乙醇。6.经冷冻干燥得昆仑雪菊提取物。(二)昆仑雪菊提取物对DPPH自由基的清除作用。1.昆仑雪菊提取物配成0.2、0.4、0.6、0.8、1.Og/L的溶液。2.取5支试管编号,分别取各浓度的试样ImL在试管中,每支试管各加入6.5x105/LDPPH•无水乙醇溶液4.0,混匀。3.混匀放置30mino4.空白对照组用无水乙醇。5.用无水乙醇调零,1cm比色皿于517nm处测定吸光度。6.根据DPPH标准曲线回归方程

8、计算DPPH质量浓度。7.计算DPPH清除率(Y)oY=[1-(Ai-A2)/Ao]x100%o8.每次实验均设5个平行管,取平均值为1次实验数据,试验重复3次,并计算出各个提取物的回归方程及半数抑制浓度。(三)实验仪器、材料和试剂1•实验仪器:分光光度计,电子天平,恒水浴及常用实验仪器2

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