he-ne激光和增强uv-b辐射对小麦pcna蛋白的影响

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1、级ｔ无分类号Ｉ巧ＵＤＣ码：ｉｏｎｓｓ单位巧雜山西师范大学研究生硕±学位论文Ｈｅ，Ｎｅ澈化和增强ＵＶ－Ｂ摇射财小麦ＰＣＮＡ蛋白的巧巧刘飞锋山西师范大学生命神牵学化指导教师姑接教授南读堂份级辄理聋领壬专业名称生物学？９曰论々摇々日期２０１６年４月１０目论义答辩日期２０化年５月１＿＿＿举仿攫予单化山西师范大学学位授予日期２０化年月曰答辩委员会主席化东涛教拔彿阅人仪慧达化搜李者坏刹教拨２０１６年４月１０曰＇＇■苗＊■■．＊－．■．＊■—－．独

2、创声明本人郑重声明：所呈交的学位论支是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中，学位论文的知识产权属于山西师范大学特别加封标注的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得山西师范大学或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。本声明的法律后果将完全由本人承担。＞签字作者签名：奇曰期；與＾备、／口１学位论文版权使用授巧书１本学位论文作者完全了解山西师范大学有关保留、使用学位论文的规定，允许，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版。论文被查閒和借阅，本人授权山

3、西师范大学可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行网络出版，可臥采用影印、缩印或扫描等复制手段保巧、汇编学位论文。（保密的学位论义在解密后适用本授权书）。作者签名：权签字日期：导师签字；签字日期；中文摘要论文题目：He-Ne激光和增强UV-B辐射对小麦PCNA蛋白的影响专业：生物学硕士生：刘飞锋签名:_____________指导教师：韩榕（教授）签名:_____________摘要随着现代科技的发展，人类的活动对环境污染造成越来越严重的影响。特别是氟氯烃等化合物的释放，使得平流层中臭氧层被破坏，造成了到达地面的太阳光中的

4、紫外线B辐射增强，对地球上的生物造成很大的危害，高剂量的UV-B引起了植物生长被抑制，生理生化、遗传物质被影响。激光作为一种物理因子，发现能够对植物的生长发育、生理生化、繁殖代谢有一定的促进作用，本课题组研究发现He-Ne激光能够修复增强UV-B辐射对小麦造成的损伤。小麦作为人类粮食的重要来源之一，研究其响应增强UV-B辐射之后，通过He-Ne激光减缓这种胁迫具有非常重要的意义。PCNA（增殖细胞核抗原蛋白proliferatingcellnuclearantigen）蛋白在细胞周期中具有非常重要的作用，是一种与细胞增殖状态相关的蛋白，由261个氨基酸

5、残基组成，其相对分子量为30KD左右。PCNA是一种核定为蛋白，PCNA的主要功能是通过对DNA聚合酶起作用，在细胞周期中参与DNA合成以及对与DNA合成过程中相互作用的蛋白进行调控，进而影响DNA的复制、染色体的组装等过程。因此对PCNA进行研究，进一步揭示细胞周期调控、有丝分裂的分子机制是非常有必要的。–2–1本研究采用了He-Ne激光（632nm，5mW·mm·2min·d）和增强UV-B（10.08-2-1KJ·m·d）辐射处理小麦（Triticumaestivum,cv）幼苗，并且设置四个不同的处理组：增强UV-B组（B）、空白对照组（CK）

6、、He-Ne激光组（L）、增强UV-B辐射组（B）和He-Ne激光处理组（L）的复合处理组（BL）。利用半定量PCR扩增技术检测小麦叶片的PCNA1和PCNA2在这四个组中含量变化情况。并用SDS聚丙烯酰胺凝胶I山西师范大学学位论文电泳法(SDS-PAGE)对其进行初步分离，同时利用蛋白免疫印迹技术（WesternBlot）对小麦细胞中存在PCNA蛋白进行初步鉴定。应用QuantityOne软件分析了四个不同处理组小麦幼苗中PCNA相对含量变化情况；使用间接免疫荧光标记技术，探究小麦根尖分生区细胞在细胞周期中PCNA蛋白与染色体的定位分布情况，并且对小

7、麦根尖细胞中PCNA蛋白与异常的有丝分裂之间的可能关系进行了研究分析，研究结果表明：1、通过SDS-PAGE和WesternBlot技术初步确定小麦中存在PCNA蛋白，测定其蛋白分子量为30KD左右。并且对四个不同处理组作对比研究后发现，UV-B处理组小麦中的PCNA蛋白含量降低，而He-Ne激光组中的含量升高。2、使用半定量PCR扩增技术对四个组小麦叶片中PCNA1和PCNA2的相对表达含量的变化进行检测，通过对比研究发现，PCNA1和PCNA2在增强UV-B组中，表达量最低，而PCNA1和PCNA2在He-Ne组中相对表达量最高，在对照组CK中表达

8、量仅次于He-Ne组。而增强UV-B和He-Ne复合组表达量只比UV-B组中高，却比其他三个组