新型适配体传感器的构建及应用于结核分枝杆菌的快速检测

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1、学校代号10532学号S1211W124分类号密级工程硕士学位论文新型适配体传感器的构建及应用于结核分枝杆菌的快速检测学位申请人姓名刘晶培养单位化学化工学院导师姓名及职称何凤姣教授苗建国高级工程师学科专业化学工程研究方向生命科学中的新分析方法论文提交日期2015-05-30湖南大学学位论文原创性声巧本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加劫标注引巧的内容外，本论文不包含枉何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中明确方式标明。本人完全意识到本

2、声明的法律后果由本人承担。作者签名：日期；年月曰＞中＾Ｘ学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版。，允许论文被查阅和借阅本人授权湖南大学可将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索Ｄ汇编本。，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存ｆ学位论文＇＂Ｉ本学位论文属于１。．保密□，在年解密后适用本授权书２．不保密请在’Ｗ”（［Ｕ上相应方框内打）’作者签名；是日期；＞／ＳＴ年＾月厂日导师證名；心曰期：年＾王日Ｗ

3、王舊連赞学校代号：10532学号：S1211W124密级：湖南大学工程硕士学位论文新型适配体传感器的构建及应用于结核分枝杆菌的快速检测学位申请人姓名：刘晶导师姓名及职称：何凤姣教授苗建国高级工程师培养单位：化学化工学院专业名称：化学工程论文提交日期：2015-05-30论文答辩日期：2015-06-04答辩委员会主席：蔡青云教授ConstructionandApplicationofNovelAptamerSensorforRapidDetectionofMycobacteriumtuberculosisByLiuJingB.E.(BaojiUniver

4、sityofArtsandSciences)2012AthesissubmittedinpartialsatisfactionoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScienceinChemistryEngineeringintheGraduateSchoolofHunanUniversitySupervisorProfessorHeFengjiaoMay,2015新型适配体压电传感器的构建及应用于结核分枝杆菌的快速检测摘要结核分枝杆菌(M.tuberculosis)可侵犯全身各器官，但以肺结核为最多见。结核病至今仍为

5、重要的传染病且严重威胁人类健康。全球每年新增结核杆菌感染者900万,且呈整体上升趋势。多重耐药性(Multi-drugresistance,MDR)的出现以及艾滋病(HIV)感染者对易感性的增强使结核的传播更加迅速。因此，结核病的早期诊断与治疗是有效控制疫情的重要举措之一。与此同时，结核杆菌能够导致无症状的潜伏感染和活动性结核。潜伏结核感染是宿主感染结核分枝杆菌后,尚未发病的一种特殊状态。但大部分潜伏结核感染最终会转化为活动性结核。同样,及时确诊潜伏结核感染是非常有必要的。近年来，结核分枝杆菌分泌的特异性抗原和表面膜蛋白成为结核病早期诊断的热点。结核分枝杆菌

6、胞壁上的糖脂类物质具有菌属特异性，而通过对结核分枝杆菌培养滤液的深入研究可知，其早期的培养滤液蛋白ESAT6-CFP10具有很好的免疫原性，且编码基因所存在的RD1区仅存在于菌复合群和少数致病性分枝杆菌中，卡介苗(BCG)和非致病性分枝杆菌中缺失。因此，用以区分致病性分枝杆菌和非致病性分枝杆菌，非常具有研究价值。本文致力于建立结核病早期诊断的新方法，主要研究工作如下：1.结核分枝杆菌早期培养滤液中的ESAT-6-CFP-10蛋白是结核分枝杆菌特有的分泌性抗原，与其单一抗原相比，具备更高的敏感性与特异性。其特点是能区分结核杆菌自然感染、BCG接种和非结核分枝杆

7、菌感染。因此可作为结核病诊断的特异性检测抗原。本文采用化学还原法制备金纳米粒子。以氯金酸为原料,柠檬酸三钠为还原剂,制备了粒径约17nm的金纳米粒子。通过紫外可见吸收光谱和透射电子显微镜对其进行了表征。结果表明:纳米金溶胶在520nm处有强的特征吸收峰,且粒径约为17nm。本文还通过纳米金与巯基标记的适配体分子自组装，通过紫外可见吸收光谱,比较了纳米金溶胶与适配体分子修饰后的纳米金溶胶的稳定性。本文利用叉指电极-串联式压电传感器，结合适配体及纳米金技术成功构建了响应结核分枝杆菌早期分泌蛋白ESAT-6-CFP-10的传感器，进而用于结核分枝杆菌早期快速诊断。

8、研究结果表明，构建的传感器可以在培养72小时内检测到