大白菜hsf家族基因鉴定及分析

《大白菜hsf家族基因鉴定及分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、＇、、“‘：；：，；气．、捧獻‘；．、’心１Ｖ．，索取号：姑密级；公巧－■＿＿＿Ｑ９４５＿．．ｉ．－、ｈ－＇一—．Ｖ、？＊－．ｖｉ＼．＿：■？？？＞，．．ＩＩＬ，＿＇‘、Ｌ．＇？．．？Ｈ、？．，－－’’一－一．＿Ｉ．Ｖ‘．＇＇―畫诚续名种挺＾凌帮響裏＂—．．记．＾±学论文．位．：每三．％歌破；為、與、＾．；＼勝／机．叫麵磯義顏．＇．．．．．．、一＇．Ｉ＾午心：－－．ｒ１４■■大白菜打如家族Ｓ因鉴定及分斩＿－■■＾．！．

2、ｊ，ｊ－．．．．．．？诚－：娜．；／巧批．＂＇＇．－．？‘＇节山＇－－＇一－喊‘寺為？．＇＇．：、？、研巧生：李红穎、．Ｉ．、燕．啼．為７．指导教师：郎念伟副教授叫＇、，商建伟硏充巧，．＾胃１；ｉ‘？‘Ｐ－＾…心王凤德剧巧巧员万．＾＾培养单位：生命科学学院‘．＊一二：‘Ｖ；．．：级学科：Ｖ生物学二；＼＿ｆ苗具‘｜一Ｉ、二级学科，成＇沪：植物学Ｖ，：．綿巧ｒ私砖Ｉ’＇１＇、心＇完成时巧：２０１５年３月巧日，苗Ｆ；‘、＾Ｉ皆＾、．‘已．．户＇■ｈ據．．货氮成？１ｌ*A~-~~=~~m

3、m~OOM±D~±D~~«*~¥H~*~£~~5E-&7t~JT)),:Jik*AtE~9fllm~r,tE!HI!?.!frPm:*~J1i~M±DI@!±D~{lM~~~*ff~~I~m~~~~*o~~*~tt~W**~~~~AB~~*~-~~~~~*o~*~~M~I~-ili-~~~~~A®-~,~BtE~*~~~~h~~~o*~~~~~~*~~~ffi*A*iBa«*8¥HSF%~£1i9~1E-&*fJT))~*AtEBii!?.Yfllffi*~J~i~iW±DI~±o~&m~,a~wm~r~~~M±o~±o~&~~o*~~~M~~*~~¥Wm*~m~,*~~~

4、~~~~~m~~~~m~~~~*o*A~~7~!HI¥~m*~~r~H~~ffl~&~~~~}E,~~~~~~#~~~$nm~~~~•~#®~~~*'ft~~~-~OO®mOOa*A~~!HI¥~~*~'m~*m~~~~~~~¥a~~~~,ey~0*~*l~~~~$EJG$7}~?{j.o1t~t£~:~11*RBM:1PJ5,6.g~ffijl~~.~~~i-~BM:~Jr-06-12-摘要摘要大白菜（BrassicarapaL.ssp.pekinensis）起源于我国，是我国种植面积最大的蔬菜作物。大白菜对高温敏感，夏季栽培的大白菜产量和品质都严重下降。因此，提高大白菜

5、耐热性是实现大白菜周年供应的重要举措。热激转录因子（Heatshocktranscriptionfactor，HSF）在热胁迫下可以激活热激基因表达，并进而提高植物耐热性。但到目前为止，尚未见关于大白菜HSF基因耐热功能的研究。通过大白菜HSF基因耐热功能的研究，将为大白菜耐热分子辅助育种提供理论依据，具有重要的理论和应用价值。本研究取得的结果如下：1大白菜HSF基因鉴定及表达模式分析本研究从大白菜基因组中共鉴定31个HSF家族基因。利用荧光定量PCR（RT-qPCR）的方法对其表达模式进行分析发现，除BrHSF3和BrHSF4未检测到转录表达外，其它29个成员对低温或者高

6、温都表现出不同程度的响应。其中BrHSF13和BrHSF14对35℃高温响应最强烈，转录水平分别是对照的3500倍和2000倍。2BrHSF14基因克隆及拟南芥转化利用RT-PCR方法克隆BrHSF14基因CDS序列。以pCAMBIA-35s-OCS为载体骨架，构建BrHSF14基因过量表达载体，然后将构建的表达载体在农杆菌介导下利用浸渗花蕾法转化拟南芥。对卡那霉素抗性植株利用半定量PCR方法和荧光定量PCR方法检测发现转基因植株均可正常转录表达目的基因。3转基因拟南芥耐热性分析高温胁迫下，比较野生型、Vector-control和过量表达BrHSF14基因植株发现，经过3

7、8℃2h、22℃2d、44℃4h，然后22℃4d处理后，野生型和Vector-control大部分死亡，两个转基因株系只有少部分死亡，存活率明显比野生型和Vector-control幼苗高。另外，测定热胁迫条件下不同基因型植株的叶绿素荧光参数发现，过量表达BrHSF14基因的两个拟南芥株系的结构功能指数(SFI)和性能指数(PI)显著高于野生型和Vector-control。上述结果表明过量表达BrHSF14基因可显著提高拟南芥的耐热性。4转基因拟南芥耐热机制分析利用荧光定量PCR的方法检测了10个与耐热性相关基因