施氏鲟早期性腺分化过程中性激素水平及其受体基因的时空表达分析

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1、学校代码：10264研究生学号：M120101014上海海洋大学硕士学位论文施氏鲟早期性腺分化过程中性激素水平及其题目：受体基因的时空表达分析Expressionofsexhormonereceptors(ERα,英文题目：ERβ,AR)duringearlystageofAcipenserschrenckiigonadaldifferentiation专业：水产养殖研究方向：繁殖生理学姓名：席庆凯指导教师：孙大江二O一五年四月十日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位

2、论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用

3、影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注滕春波东北林业大学教授答辩主席尹家胜黑龙江水产研究所研究员答辩委员刘伟黑龙江水产研究所研究员答辩委员张震黑龙江水产研究所副研究员答辩秘书答辩地点黑龙江水产研究所答辩日期2015.06.05上海海洋大学硕士学位论文施氏鲟早期性腺分化过程中性激素水平及其受体基因的时空表达分析摘要施氏鲟是我国重要淡水特产鱼

4、类，具有极高经济价值。目前，我国已是世界养鲟大国，施氏鲟作为本土养殖品种具有重要的研究意义。随着高附加值鲟鱼子酱的开发及其优质苗种的需求，市场迫切需要优质雌鱼。然而施氏鲟性成熟较晚、无副性征，生产中雌雄同养的局面严重制约其产业发展。因此，本研究以施氏鲟早期性腺发育过程为研究切入点，运用组织学、内分泌学及分子生物学等研究手段，研究早期性腺分化过程中，酶，性激素水平变化规律及性激素受体的时空表达规律，并比较了早期性腺分化敏感期Kisspeptin脑室注射对雌激素受体基因（ER）和雄激素受体基因（AR）表达影响。从而解析施

5、氏鲟早期性腺发育过程中的分子调控机制。结果与结论如下：1.施氏鲟胚胎发育的卵黄栓期及心搏期可溶性蛋白含量最低，孵出前期维持在较高水平、最高值出现在视泡期，且均存在显著性差异（P＜0.05）；睾酮（T）含量显著降低，17β-雌二醇（E2）含量在孵出前期显著升高（P＜0.05），且均在孵出前期有一峰值；酸性磷酸酶(ACP)、还原型谷胱甘肽（GSH）含量先降低而后显著升高（P＜0.05），过氧化氢酶(CAT)活性呈显著升高趋势（P＜0.05），碱性磷酸酶(AKP)活性变化不大，丙二醛（MDA）含量始终维持在较低水平心搏期后

6、呈上升趋势，超氧化物歧化酶(SOD)活性在卵黄栓期显著降低随后趋于稳定。研究表明：施氏鲟胚胎发育阶段已经具备一定的性激素合成能力；各种免疫相关酶在胚胎发育阶段所起作用不同，胚胎在神经胚期的高死亡率与其受氧化损伤较大有关。2.施氏鲟幼鱼生长阶段与性腺分化过程中性激素含量及性激素受体基因(ERα,ERβ,AR)表达变化。仔鱼孵出7天、14天时雌二醇、睾酮含量显著高于其他时期，且雌二醇含量显著高于睾酮含量，这与其他时期雌二醇显著低于睾酮含量的规律不一致，说明在7—14天这个时间段仔鱼的生理活动存在明显的变化。施氏鲟脑与性腺

7、AR、ERα表达量均呈先降低后升高的趋势。性腺分化结束后（190天），脑部AR表达量显著高于性腺分化期间表达量。推测AR在施氏鲟性腺分化结束I上海海洋大学硕士学位论文后对脑的分化发育仍具有特殊的功能。脑部ERβ基因表达量呈先升高后降低的趋势，而性腺ERβ基因表达量随分化的进行呈明显降低的趋势且差异显著。3.施氏鲟性腺分化期注射kiss1、kiss2多肽对性激素含量及性激素受体基因(AR,ERα,ERβ)表达的影响。注射kiss1组脑部与性腺雌二醇含量随注射次数增加而递增，睾酮含量在三次注射后显著降低。注射kiss2组

8、脑部与性腺在初次注射和3次注射后含量形成峰值，脑部雌二醇、睾酮含量波动幅度显著低于性腺雌二醇、睾酮含量变化幅度。注射kiss1对脑与性腺AR表达量无明显影响；对脑部ERα表达起抑制作用，性腺ERα表达在3次注射后形成表达小高峰；性腺ERβ在2次注射后达到表达高峰。注射kiss2组脑部AR表达量初次注射后降低，3、4次注射后逐渐升高，性腺AR表达