rnf135通过erk调控细胞周期促进胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移的体内和体外研究

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1、ｎ博±学位论文■ＩＰ．ｉ＾Ｈｒ御■ｋＨＨＩ！ＲＮＦ１３５通过ＥｒＳ调控细ｉ周期促进胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移的体内和体外研究作者姓為：：ｇ刘勇建．．…＿＿＿、指导教师：大连医科大学１９中图分类号密级ＲＮＦ１３５通过ＥＲＫ调控细胞周期促进胶质母细胞瘡细胞巧殖、迁移的体内和体外研究ＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＲＮＦ１３５ＥｎｈａｎｃｅＧｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａＣｅｌｌＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄＭｉｇｒａｔｉｏｎＴｈｒｏｕｈＥＲＫＲｅｕｌａｔｅＣｅｌｌ

2、Ｃｃｌｅ出ｖｉｖｏａｎｄｖｉｔｒｏｇｇｙ博±研究生：刘勇建指导老师；徐英辉教授学科专业；外科学计：学位论文；６６页表格；５个插图；１０幅指导教师；徐英辉教授申请学位级别；博±学位学科（专业）；外科学培养单位—五年五月；大连医科大学完成时间：二〇答辩委员会主席：独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在指导教师指导下进行的研究工作及所取得的研究成果。除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医

3、科大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。■学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的说明、本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。＂’’本学位论文属于（请在＾

4、１心）：１下相应方框内打１．保密□，在年解密后适用本授权书。２．不保密Ｄ。作者签名：日期：年月日导师签名；日期：年月曰目录一＞摘要１一中文摘要１（）（二）英文摘要４二、正文７一引言７（）二前言７（）Ｈ材料和方法１１（）１．材料１１１．１试剂１１１．２实验仪器１３１、．３样本动物和细胞１４１．４主要溶液的配置１４２１８．实验方法…２１８．１细胞处理２．２慢病毒感染实验１９２．３ＭＴＴ实验２３２－．４

5、ＲｅａｌｔｉｍｅＲＴＰＣ民实验２３２．５ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ实验２６２．６细胞周期实验２９２．７免疫组化２９２．８划痕实验３１２．９Ｂｏｙｄｅｎ小室迁移实验３１２．１０荷瘤裸鼠实验３２２．１４统计分析３３（四）结果３３１．ＲＮＦ１３５基因在胶质瘤组织中较正常脑姐织的窩表达３３２．ＲＮＦ１３５髙表这胶质瘤患者术后生存时间短３５３．用慢病毒构建稳定低表达ＲＮＦ１３５的Ｕ８７细胞系３７４．３５７干扰ＲＮ門可Ｗ抑制腑细胞系增殖％．干扰Ｒ

6、ＮＦ１３５可Ｗ抑制Ｕ８７细胞系迁移５％．６干扰ＲＮＦ１３５可Ｗ抑制ＥＲＫ的磯酸化４０７．干犹ＲＮＦ１３５可Ｗ在Ｇ０／Ｇ１期阻滞细胞周期４１８．干扰ＲＮＦ１３５基因后ＣＤＫ４的表达降低，ｐ２７和ｐ２１的表达増加４２９．干扰ＲＮＦ１３５基因后Ｕ８７细胞在裸鼠体内的增殖速度减慢４３（五）讨论！４３（六）结论４７Ｈ、参考文献４８四、文献综述５４五、致谢６２大连医科大学博±毕业论文摘要１、目的：探讨ＲＮＦ３５基因与胶质母细胞瘤发生发展及预后的联系，并通过体内及体

7、外实验研巧ＲＮＦ１３５基因对胶质母细胞瘤细胞Ｕ８７的増殖、迁移及细胞周期的影响及ＲＮＦ１３５基因对Ｕ８７细胞作用的机制，为胶质母细胞瘤提供新的基因治疗祀点。方法：首先对２８例胶质瘤组织和１２例正常的脑组织采用实时定量ＰＣＲ与ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ实验检测狙织中ＲＮＦ１３５基因的表达差异。采用免疫组化实验比较１２３例胶质瘤和１２例正常脑组织中ＲＮ門３５蛋白的表达情况，（标本来源２００４６一年７月到２００９年月，在大连医科大学附属第医院手术的胶质瘤患者，正常脑组织为外伤、脑出血手术患者术区周边非功

8、能区脑组织，所有标本获得都经一过大连医科大学附属第医院医学伦理委员会批准），用统计学分析ＲＮＦ１３５基因表达与患者年龄、性别、胶质瘤病理组织类型、预后及生存时间是否有相关性。然后通过构建ｓｈＲＮＦ１３５稳转的Ｕ８７胶质母细胞瘤细胞系，研巧ＲＮＦ１３５基因对胶质母细胞瘤细胞Ｕ８７增殖、迁移