mir16对胶质母细胞瘤u87细胞增殖影响的体外及体内实验研究

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1、万方数据温州医科大学硕士学位论文论文题目：堡i＆：!鱼型膣质量细胞疽堕墨2细胞增殖髭响的馇之E丞馇凼塞验婴宜答辩委员会主席：王茂德答辩委员会成员：王茂德诸蔓庭剑郑住明万方数据温州医科大学硕士学位论文目录1．j][：．：jI：：．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．3缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6】．4劳享⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．81．5材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．5．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．91．52方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．121．6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．191．7分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．25工．8缮硷⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．291．9参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．302附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．333致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．344综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．354．1综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯354．2参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．405独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．43㈣0Ⅲ7洲5mml㈣9Ⅲ6㈣2叭Y万方数据温州医科大学硕士学位论文miR一16对胶质母细胞瘤U87细胞增殖影响的体外及体内实验研究中文摘要背景：脑胶质瘤的传统治疗方法包括手术切除、放疗及化疗，然而其预后仍然不良。在传统治疗方法面临局限

5、的时候，microRNAs作为调节性RNAs可能在胶质瘤中发挥巨大的作用。已有大量研究表明在胶质瘤中存在多种microRNAs表达变化，如miR．221、miR一451、miR一296等表达上调并作为原癌基因发挥作用，而miR．34a、miR．133a、miR一23a等表达下调而作为抑癌基因发挥作用。MicroRNAs靶向治疗将是未来胶质瘤治疗的一个有力前景。目的：探索miR．16对脑胶质瘤细胞U87MG在体外及体内的增殖抑制作用，进而为临床治疗脑胶质瘤提供依据。方法：通过携带miR．16基因的慢病

6、毒(Lentivirus．hsa—GFP．miR一16)及阴性对照病毒(Lentivirus—hsa．GFP)分别感染U87MG细胞而获得miR一16过表达U87MG细胞及阴性对照细胞。利用荧光显微镜检测GFP绿色荧光以分析病毒感染效率及用RT-PCR技术分析miR．16表达情况。用蛋白印迹法(WB)检测cyclinDl表达情况。将阴性对照慢病毒感染细胞及miR一16过表达慢病毒感染细胞扩增，经皮下注射建立皮下移植瘤模型。将未感染慢病毒细胞作为未感染组(untransfected)，阴性对照慢病毒感

7、染细胞作为阴性对照组(negativeconctrol，NC)，miR-16过表达慢病毒感染细胞作为阳性组)(miR．16)。将三组细胞扩增，经原位脑立体注射建立原位脑胶质瘤模型。达到观察点后对颅内肿瘤标本进行HE及CD31、cyclinDl免疫组化染色。在原位脑胶质瘤模型中计算肿瘤体积并作统计学分析。在皮下成瘤实验中测算肿瘤生长曲线。结果：1．慢病毒感染后荧光检测及RT．PCR结果：慢病毒感染后第3天，将miR-16组及Nc组细胞荧光显微镜下激发绿光显示两者相对于普光下细胞，感染效率>80％。RT

8、—PCR检测显示miR．16组miR一16表达为NC组的3．647倍(p