常压直接质谱分析技术快速诊断肺癌的分子基础研究

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1、分类号：密级：UDC：学号：406521212475南昌大学硕士研究生学位论文常压直接质谱分析技术快速诊断肺癌的分子基础研究MolecularBasedOfAmbientMassSpectrometryInTheFastDiagnosisofLungCancer温华培养单位（院、系）：南昌大学第二附属医院指导教师姓名、职称：徐建军教授主任医师申请学位的学科门类：医学学科专业名称：外科学（胸心外科）论文答辩日期：2015年6月答辩委员会主席：刘季春教授评阅人：熊汉鹏教授陈艰教授2015年06月学位论文独创性声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的

2、研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、

3、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：导师签名（手写）：签字日期：年月日签字日期：年月日论文题目姓名学号论文级别博士□硕士□院/系/所专业E_mail备注：□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：常压直接质谱分析（ambientmassspectrometry，AMS）是近年来迅速发展的基于样品中分子组成或含量的不

4、同而实现样品检测的一种快速分析测试方法，较之以前的方法只需要对临床样品进行简单的处理或者不对样品进行任何处理就可以检测。尖端电喷雾离子源（Tip-sprayionization，TSI）是AMS的一种离子源，本研究采用TSI-MS分析肺癌组织及肺癌旁组织，探索潜在的肺癌分子标志物，从而达到对肺癌早期的快速诊断。方法：对留取的肺组织不进行任何的预处理，采用自制的甲醇萃取辅助的尖端放电喷雾离子源对20例肺癌患者的肺癌组织、癌旁组织和9例肺部良性疾病组织进行质谱检测，选取甲醇为萃取剂，调节流速为4ul/min，设置在正离子模式下，设定一级质谱、多级质谱的扫描范围为均为m/z50-

5、1000，离子传输管温度150℃，喷雾电压3.5KV，透镜电压65.0V，选定离子的隔离宽度为1.6Da，碰撞能量为13%。用主成分分析(principalcomponentanalysis，PCA)方法对肺癌组织与癌旁组织和肺部良性疾病组织的质谱指纹谱图进行快速分类和鉴别；对11例肺癌患者+的肺癌和癌旁组织的差异性m/z756.7、782.7、808.7、832.7及标准品[DPPC+Na]、+++[POPC+Na]、[DOPC+Na]、[SAPC+Na]进行多级质谱检测。结果：通过TSI-MS检测及运用PCA可以有效的区分肺癌组织和癌旁组织及肺癌组织和肺部良性疾病组织，

6、癌旁组织和肺部良性疾病组织不能区分；肺癌组织和癌旁组织的差异性物质为m/z756.7、782.7、808.7、832.7；m/z756.7、782.7、+++808.7、832.7的多级谱图均与标准品[DPPC+Na]、[POPC+Na]、[DOPC+Na]、+[SAPC+Na]的多级谱图相符，即肺癌的差异性物质为二棕榈酰基卵磷脂DPPC、1-棕榈酰基-2-油酰基卵磷脂POPC、二油酰磷脂酰胆碱DOPC、花生四烯酰-硬脂酰磷脂酰胆碱SAPC。结论：AMS耦合PCA能够有效地将肺癌组织与肺癌旁组织及肺部良性疾病组织的质谱指纹信息区分，从而快速鉴别出肺癌组织，TSI-MS利用多

7、级质谱分析可以II摘要很好的对肺癌和癌旁组织的差异性磷脂进行定性，DPPC、POPC、DOPC、SAPC可能成为潜在的肺癌分子标志物，为开发新的肺癌诊断方法提供新的思路以及为研究肺癌的发生机制提供新的思路。关键词：肺癌；多级质谱分析；常压直接质谱IIIAbstractABSTRACTObjective:Inrecentyears,ambientmassspectrometry(AMS)isarapidanalyticalmethodwhichbasedonadifferentcompositionorcontent